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飼料中*的測定液相色譜法

2012年04月05日 16:49:45人氣:1419來源:杭州賽析科技有限公司銷售部

 

飼料中*的測定液相色譜法
                                                           GBT 8381.10-2005
1 本標準規(guī)定了以GE-200液相色譜(HPLC)儀測定飼料中磺胺喳唔琳的方法。本標準適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預(yù)混合飼料中磺胺喳唔琳的測定,zui小檢測濃度為5.0 mg/kg.
2 規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤內(nèi)容)或修訂版均不適用本標準,然而,鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的版本。凡是不注日期的引用文件,其版本適用于本標準。
3 原理
用甲醇水溶液提取飼料中的磺胺喳嗯琳,離心,過濾,在HPLC儀上分離測定。
4 試荊和溶液
以下所用的試劑,除特別注明外均為分析純試劑;水為蒸餾水,色譜用水符合GB/T 6682一級水的規(guī)定。
4. 1 磺胺唾嗯琳標準品:含磺胺唆唔琳(G14HUN402S) 95-0%-
4.2 甲醇:色譜純。
4.3 磷酸鹽溶液:取磷酸二氫鉀3.4 0g 和*5.7 1g ,加水溶解并稀釋至10 00m L
4.4 磺胺喳唔琳標準溶液:準確稱取磺胺喳唔琳(4.1)50 mg,溶于甲醇并稀釋成。. 1 mg/ mL的儲備液,置4℃冰箱中避光保存。有效期1個月。臨用前,取此儲備液用水稀釋成適當濃度的標準工作液。
4.5 提取液:甲醇100 mL+水50 mLo
5 儀器
5. 1實驗室常用儀器設(shè)備。
5.2GE-200液相色譜儀配GE-200紫外檢測器)。
5.3分析天平:感量為。.00 01 g 和。.001g o
5.4旋渦振蕩器。
5.5離心機:4 000 r/mine
5.6針頭過濾器:備孔徑為0. 45 um微孔濾膜。
6 試樣的制備
按GB/T 14699.1規(guī)定方法采樣,選取有代表性的飼料樣品,至少500g ,四分法縮減至100g ,磨碎,通過。0.45 mm孔篩,混勻,裝人密閉容器中,避光低溫保存?zhèn)溆谩?/div>
7 分析步驟
7.1 提取
稱取5g試樣,至0.0 01g ,加人提取液(4.5 )50 m L,旋渦振蕩器混勻,超聲水浴中提取15min,中間取出搖動1次,然后以4 000 r/min離心5 min,靜置,取上清液過0.45 pm濾膜,供液相色譜測定。
7.2 標準曲線的制備
準確吸取儲備液適量,用水或流動相稀釋成濃度分別為。0.10,0.50,1.00,2.00,10.00ug/m L的磺胺咬唔琳標準溶液,作出標準曲線。
7.3 測定
7.3. 1 色譜條件
色譜柱:C18柱,柱長150m m,柱內(nèi)徑4.6m m,粒度5m,或VertexC18色譜柱,4.6*150,5um。
流動相:磷酸鹽溶液75ml+甲醇25ml,用前過0.45u m濾膜,并超聲脫氣。
流速: 1 ml/min,
檢測波長:240nm.
進樣量:10ul-20ul
7.3.2 定性與定f方法
根據(jù)標準品色譜的保留時間定性,定量由標準曲線或單點校準。
7.4 結(jié)果的計算和表述
試樣中磺胺峰PAR,琳的含量按式(1)計算:
X=m1/m*n (1)
式中:
X一試樣中磺胺唆嗯琳的含量,單位為毫克每千克(mg/kg) ;
M1一色譜峰面積對應(yīng)的磺胺喳唔琳的質(zhì)量,單位為微克(ug) ;
n— 稀釋倍數(shù);
m—試樣的質(zhì)量,單位為克(g)。
平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示,保留至小數(shù)點后1位
重復(fù)性
在同一實驗室,由同一操作人員使用同一臺儀器完成的兩個平行測定結(jié)果的相對偏差不大于10% ,
 
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