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生化實(shí)驗(yàn)室常用儀器操作一覽

2011年03月08日 15:07:46人氣:1956來(lái)源:金壇市梅香儀器有限公司

 
【冷凍真空干燥機(jī)】

 

基本原理
高真空狀態(tài)下,利用升華原理使預(yù)先凍結(jié)的物料中的水份直接從冰態(tài)升華為水蒸汽而被除去,從而使物料干燥。真空冷凍干燥廣泛應(yīng)用于多種產(chǎn)品,可確保物品中蛋白質(zhì)、維生素等各種營(yíng)養(yǎng)成份,特別是那些易揮發(fā)熱敏性成份不損失,因而能zui大限度地保持原有的營(yíng)養(yǎng)成份。還能有效防止干燥過(guò)程中的氧化,可以避免營(yíng)養(yǎng)成份的轉(zhuǎn)化和狀態(tài)變化。凍干制品呈海綿狀、無(wú)干縮、復(fù)水性好、含水份極少,相應(yīng)包裝后可在常溫下長(zhǎng)時(shí)間保存和運(yùn)輸。

操作步驟
1、系統(tǒng)準(zhǔn)備
檢查系統(tǒng)是否清潔和干燥,真空泵與冷凍機(jī)是否連接,接通電源,檢查排氣口、冷凍管的密封性。
2、加樣
樣品需要預(yù)冷到至少-40℃,可以在深低溫冰箱(-70℃)或者液氮(-196℃)中進(jìn)行。打開(kāi)密封管開(kāi)關(guān),搬開(kāi)冷凍艙,將樣品置于冷凍艙里的隔板上。關(guān)閉密封管開(kāi)關(guān)。
3、冷凍
打開(kāi)冷凍開(kāi)關(guān),等待20~30分鐘,直到冷凍艙的溫度低于-40℃。
4、抽真空
打開(kāi)真空泵開(kāi)關(guān),等待10~15分鐘,直到系統(tǒng)壓力低于100 millitorr。
5、監(jiān)控過(guò)程
確保系統(tǒng)參數(shù)(冷凍溫度、真空壓力)在正常范圍內(nèi);
定期檢查冷凍艙中的結(jié)冰情況,決定是否要除霜;
觀察樣品是否干燥*,一般干燥過(guò)程需要24~72小時(shí),視具體樣品通過(guò)目測(cè)而定。
6、關(guān)閉系統(tǒng)
關(guān)閉總開(kāi)關(guān),接上排氣管或打開(kāi)密封管開(kāi)關(guān)以解除真空狀態(tài)。
關(guān)閉真空開(kāi)關(guān),關(guān)閉冷凍開(kāi)關(guān),取出樣品。
7、系統(tǒng)維護(hù)
除霜:冷凍艙下面的壓縮艙內(nèi)如果有霜,則接上排水管,然后用少量熱水(不能超過(guò)壓縮艙容積的一半)促進(jìn)冰霜的融化。不能通過(guò)敲擊冰塊來(lái)除霜。
除濕:壓縮艙、冷凍艙、真空泵壓縮機(jī)以及墊圈等表面的水霧均需擦干。
清潔:壓縮艙、冷凍艙可以用溫和的去污劑或蘇打水來(lái)清洗,然后干燥并撤去排水管,并重新密封排水孔。
泵油:定期檢查油位,排除油霧。
 
注意事項(xiàng)
1、樣品要保持冷凍,不能“回融”。
大多數(shù)溶劑的冰點(diǎn)高于-40℃,所以冷凍艙溫度低于-40℃可以使一般樣品保持冰態(tài)。
為確保樣品不“回融”,可將冰凍的樣品制成小于20 mm的小塊。
2、有毒或有腐蝕性的樣品。
不要用來(lái)冷凍干燥,如果一定要用,則更加需要系統(tǒng)維護(hù),并需要另外定購(gòu)特定的濾器以保護(hù)真空泵。
3、真空泵油需保持干凈。
微黃或無(wú)色的油是干凈的,顏色變深表示有酸污染,霧狀渾濁表示有水污染。有污染時(shí)需要更換好油。
 
【自動(dòng)雙重蒸餾水器】
 
操作說(shuō)明
1.擰開(kāi)自來(lái)水,讓水流開(kāi)始較為細(xì)小,觀察*管水位超過(guò)石英加熱管;
2. 接通電源,按下*管的ON開(kāi)關(guān),這時(shí)水速仍以細(xì)小為主,等待*管內(nèi)自來(lái)水沸騰,這時(shí)候?qū)⑺髦饾u調(diào)大至適中程度;
3. 等待第二管內(nèi)自來(lái)水超過(guò)石英加熱管,按下第二管的ON開(kāi)關(guān),第二管隨即加熱,注意觀察兩個(gè)管子的水位變化,及時(shí)做出調(diào)整。
4.一般來(lái)說(shuō)有下面三種情況:
a→*管水位過(guò)高,接近水蒸氣散出口,這時(shí)宜將調(diào)整水位的橡膠管放置低于玻璃管位置,待自來(lái)水流出至適當(dāng)位置,將橡膠管回復(fù)原位;
b→*管水位過(guò)低,調(diào)整自來(lái)水加大進(jìn)水,或者調(diào)節(jié)橡膠管上控制開(kāi)關(guān)加大進(jìn)水,乃至關(guān)閉電源待進(jìn)水到適當(dāng)位置,重新打開(kāi)電源,繼續(xù)蒸餾。
C→第二管水位過(guò)低,按下第二管的OFF開(kāi)關(guān),待水位升高超過(guò)石英加熱管時(shí)再開(kāi)始蒸餾。
5. 雙蒸結(jié)束,先關(guān)閉控制面板上OFF兩個(gè)電源,然后關(guān)自來(lái)水。
 
【3560C高壓鍋】
 
操作程序
 
1.打開(kāi)鍋蓋,倒入蒸餾水,滿(mǎn)至WATER LEVEL,以后每次使用時(shí),必須補(bǔ)足水滿(mǎn)到WATER LEVEL。
2.把插頭插上電源,按電源開(kāi)關(guān)ON,顯示器指示燈亮起,機(jī)器開(kāi)始進(jìn)行程序自檢。
3.按顯示屏的提示輸入工作密碼。
4.放置待滅菌的物品入滅菌室,并旋緊鍋蓋。
5.根據(jù)所高壓物品的不同,按過(guò)程選擇鍵1-6中的某一數(shù)字選擇不同的滅菌流程。一般固體滅菌選擇按鍵4,液體滅菌選擇按鍵5。特殊要求的,可以先按下MODE鍵,輸入工作密碼。選擇要重新設(shè)置的項(xiàng)目進(jìn)行修改。
6.按啟動(dòng)鍵START鍵,即開(kāi)始此滅菌模式。
NOTE:須待機(jī)器進(jìn)入正常運(yùn)行程序后,人方可離開(kāi)。
7.當(dāng)滅菌流程結(jié)束時(shí),響鈴鳴叫30秒。
8.確認(rèn)壓力顯示器的壓力降為0以后,把鍋門(mén)把手旋松,讓殘余蒸氣釋出,待5-10分鐘后推開(kāi)跨桿,準(zhǔn)備取出滅菌物品。如需高壓另一鍋,則需重新加水滿(mǎn)到WATER LEVEL,同時(shí)處理廢水收集瓶中的廢水。
9.在高壓鍋使用記錄上進(jìn)行登記。

 
【PK-121R離心機(jī)】
 
 操作步驟:
1、將離心機(jī)打開(kāi),儀器此時(shí)的工作狀態(tài)為zui后操作設(shè)置的參數(shù)。
2、平衡離心管,兩兩對(duì)稱(chēng)放入離心機(jī)。
3、蓋好離心蓋,蓋子鎖上時(shí)才能離心。
4、選擇操作模式:
 設(shè)置參數(shù):1)離心速度:300rpm~14000rpm;2)離心時(shí)間:1min~99min;
3)離心溫度:-10℃~40℃;4)zui低加速度:1~5個(gè),1zui慢
 5)zui低減速度:0~4 coast-down,(0是慣性)
(1)手工模式:不重新設(shè)置時(shí),按上次設(shè)置的參數(shù)離心,可以重新設(shè)置參數(shù)離心。
(2)程序模式:可預(yù)先設(shè)置5個(gè)程序儲(chǔ)存,不同的程序按不同的序號(hào),相應(yīng)的指示燈亮,再按另外的序號(hào)可以選另外的程序。
(3)瞬時(shí)(MOM)操作模式:持續(xù)按MOM鍵,可使離心達(dá)到zui大速度和zui大加速度,當(dāng)放開(kāi)時(shí)離心減慢直到停止,離心時(shí)顯示的時(shí)間是已經(jīng)用了的時(shí)間(以秒計(jì)數(shù))。
5、按START鍵,開(kāi)始離心,綠燈亮。此時(shí)顯示實(shí)際的離心速度和溫度,時(shí)間為剩余時(shí)間。
6、當(dāng)設(shè)置時(shí)間到,離心機(jī)通過(guò)制動(dòng)裝置自動(dòng)停止離心,黃燈亮,可以打開(kāi)離心蓋。

如何設(shè)置相應(yīng)參數(shù)?
1、用”key-programe”取消錯(cuò)選的程序。
2、用“SOFT ACL”鍵設(shè)置加速度:高加速燈滅,低加速燈亮;按住鍵3秒,燈閃爍,用設(shè)置離心速度的鍵選擇1~5
3、用“SOFT DCL”鍵設(shè)置加速度:高減速燈滅,低減速燈亮;按住鍵3秒,燈閃爍,用設(shè)置離心速度的鍵選擇0~4
4、設(shè)置離心溫度、速度和時(shí)間:當(dāng)“SET”燈閃爍時(shí),可以改變參數(shù),用箭頭鍵選擇。設(shè)置后3秒,燈停止閃爍,自動(dòng)確認(rèn)。
如何記憶一個(gè)程序?
1、在設(shè)置的參數(shù)閃爍時(shí),按程序鍵1~5,當(dāng)程序鍵旁的燈亮?xí)r,參數(shù)被儲(chǔ)存。
2、保護(hù)程序不被修改:可以在參數(shù)閃爍時(shí),按一個(gè)程序鍵的同時(shí)按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。取消保護(hù)時(shí)再次按程序鍵同時(shí)按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。
警告信息:
1、END:在每次離心循環(huán)結(jié)束時(shí)顯示,在進(jìn)行下一次操作時(shí)顯示設(shè)置得參數(shù)。
2、LID:當(dāng)離心開(kāi)始而蓋子沒(méi)蓋緊時(shí)顯示,并報(bào)警。
3、IMBAL:當(dāng)離心物品不平衡時(shí)顯示,并報(bào)警。
4、MAIMS:當(dāng)動(dòng)力系統(tǒng)出錯(cuò)時(shí)顯示。
5、OVERT:當(dāng)離心室里的溫度>45℃時(shí)顯示。
6、SET:當(dāng)設(shè)置速度大于zui大離心速度時(shí)顯示。
注意事項(xiàng):
1、離心時(shí)不要移動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)儀器。
2、不要使用說(shuō)明書(shū)不允許使用的轉(zhuǎn)子和附屬物。
3、不能超過(guò)zui大轉(zhuǎn)速。
4、不使用不適合離心的管子或瓶子。
5、不在儀器周?chē)胖梦kU(xiǎn)品。
6、不使用易燃易爆物。
 
【雜交爐】

操作步驟
1、設(shè)置溫度
按一下up或down鍵,顯示屏將由亮到暗開(kāi)始閃爍,此時(shí)顯示的是上次設(shè)置的溫度。如需改變,則通過(guò)up或down鍵來(lái)上調(diào)或下調(diào)。停按5秒鐘后,數(shù)字停止閃爍,并開(kāi)始顯示爐內(nèi)溫度。(*次使用前需要至少24小時(shí)來(lái)穩(wěn)定加熱器。)
2、校準(zhǔn)
需要校準(zhǔn)顯示溫度與實(shí)際溫度是否一致。將一枝標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)置于樣品附近,穩(wěn)定1小時(shí)后,比較2者的數(shù)值是否一致。
如需校準(zhǔn),則同時(shí)按住up和down鍵直到顯示屏上數(shù)字中前后2個(gè)小數(shù)點(diǎn)開(kāi)始閃動(dòng),然后用up或down鍵來(lái)改變數(shù)值,使其與溫度計(jì)的參考數(shù)值一致。再次穩(wěn)定加熱器。
3、轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)
轉(zhuǎn)動(dòng)開(kāi)關(guān)有3個(gè)位置,上位表示開(kāi),其轉(zhuǎn)速可在0~15 RPM之間調(diào)節(jié);中位表示關(guān);下位表示短時(shí)間轉(zhuǎn)動(dòng),按住才轉(zhuǎn)動(dòng)松開(kāi)即關(guān)。
維護(hù)
使用前后觀察系統(tǒng)是否清潔,如果不是,則需要清洗。
1、顱腔
用肥皂和水進(jìn)行清洗,然后干燥。如有污染,則用適當(dāng)?shù)南緞┣逑?,注意不要用含氯漂白劑,否則容易造成損壞。
2、接水盤(pán)和旋轉(zhuǎn)架
先取下來(lái),然后用同樣的溶液進(jìn)行清洗。
 
【Moder 583型干膠儀】
 
操作步驟
1.將干膠儀的排水管連接到真空泵上,閥門(mén)旋到開(kāi)的位置。
2.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。
3.選擇干膠CYCLE:
a.按CYCLE健兩次;
b.當(dāng)燈在閃動(dòng)狀態(tài)時(shí),按RAISE或LOWER健選擇干膠CYCLE。
4.  選擇循環(huán)溫度:
a.按TEMP鍵兩次;
b. 當(dāng)燈在閃動(dòng)狀態(tài)時(shí),按RAISE或LOWER健選擇溫度。
5.選擇循環(huán)時(shí)間:
a.按TIME鍵兩次;
b. 當(dāng)燈在閃動(dòng)狀態(tài)時(shí),按RAISE或LOWER健選擇時(shí)間。
6.將膠放在干膠儀里(將膠放在透明的保護(hù)蓋的下面,在膠的表面覆蓋一層塑料薄膜)。
7.打開(kāi)真空泵。
8.按START鍵開(kāi)始干膠程序。
9.干膠程序完成后,打開(kāi)透明的保護(hù)蓋,閥門(mén)旋到開(kāi)的位置,然后關(guān)掉真空泵。
干膠時(shí)間的選擇

 

膠的濃度                膠的厚度              80℃所需時(shí)間
3%至20%                 0.375mm        30min
3%至20%                 0.5mm                  40min
3%至10%                 0.75mm                 40min到60min
10%至20%                0.75mm                 60min到120min
3%至10%                 1.5mm                  45min到60min
10%至20%                1.5mm                  60min到120min
3%至10%                 3mm                    60min到120min
10%至20%                3mm                    120min到180min

 

 
 
【Leica熒光顯微鏡】
 
簡(jiǎn)要操作步驟
1.打開(kāi)12V/100W Leica的電源開(kāi)關(guān),至少預(yù)熱10分鐘。
2.打開(kāi)顯微鏡的電源開(kāi)關(guān)。
3.放置樣品,調(diào)好放大倍數(shù)、焦距和視野。
4.移動(dòng)light stop至     。
5.滑動(dòng)filter block至相應(yīng)光路。
6.將光線(xiàn)調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)到zui小。
7.鏡下觀察樣品的熒光染色情況。
8.如果樣品有微紅色背景,可以將BG 38 filter移動(dòng)至     ,以消除背景色的干擾。
9.如要拍照,需將相機(jī)與顯微鏡連接,將顯微鏡上的拉桿拉出,這時(shí)在相機(jī)上可直接觀察樣品的熒光染色情況,并拍照保存。
10.結(jié)束后,關(guān)掉顯微鏡和12V/100W Leica的電源開(kāi)關(guān)。
 
 
【PCR儀】
 
操作步驟

 

-RUN       ENTER
PROGRAM  PROGRAM

 

1、開(kāi)機(jī):打開(kāi)開(kāi)關(guān),視窗上顯示“SELF TEST”,顯示10秒中后,顯示RUN-ENTER菜單:準(zhǔn)備執(zhí)行程序。
2、放入樣本管,關(guān)緊蓋子。
3、如果要運(yùn)行已經(jīng)編好的程序,則直接按《Proceed》,用箭頭鍵選擇已儲(chǔ)存的程序,按《Proceed》,則屏幕顯示:

 

-ENABLE      DISABLE
heated  lid

 

按《Proceed》選擇ENABLE,則開(kāi)始執(zhí)行程序。

 

-NEW     LIST
EDIT     DELET

 

4、如果要輸入新的程序,則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕顯示            

 

Step 1      _TEMP
GOTO   Opiton   End

 

按《Proceed》,1)選擇NEW,命名新的程序,zui多8個(gè)字母,輸入后按《Proceed》確認(rèn)(如何輸入字母、數(shù)字)。
2)輸入程序步驟:名字輸入后,顯示                     
按《Proceed》則可以輸入溫度(0~100℃),按《Proceed》確認(rèn)后,則可以輸入孵育時(shí)間,用《Select》鍵移動(dòng)光標(biāo),輸入數(shù)字,完成后按《Proceed》確認(rèn),跳到下一步,輸入方式同上。
3)選擇GOTO,輸入循環(huán)步驟時(shí)鏈接到第幾步(循環(huán)數(shù)zui多可達(dá)9999次)(為實(shí)際循環(huán)數(shù)-1)。

 

Step    extend
Increment  slope

 

4) 選擇option,再選擇increment,按《Proceed》確認(rèn),輸入初始的溫度,確認(rèn)后輸入時(shí)間,按《Proceed》確認(rèn),然后輸入每個(gè)循環(huán)增加或減少的溫度,增加用正值,減少用負(fù)值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》確認(rèn)。
選擇extend, 按《Proceed》確認(rèn),輸入每個(gè)循環(huán)增加或減少的時(shí)間(-60~60秒),按《Proceed》確認(rèn)。
選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》確認(rèn),然后輸入加熱或致冷的速度,按《Proceed》確認(rèn)。
4)選擇End,輸入結(jié)束步驟。
5、輸入完成的程序后,到RUN-ENTER菜單,選擇新程序,開(kāi)始運(yùn)行。
6、其它:用《pause》可以暫停一個(gè)運(yùn)行的程序,再按一次繼續(xù)程序。
用《stop》或《Cancel》可停止運(yùn)行的程序。
編輯程序:
1、可以用《Cancel》鍵刪除輸錯(cuò)的值,輸入新的值后按《Proceed》確認(rèn)。
2、對(duì)于未輸完的程序,要先輸入END,按《Proceed》將程序儲(chǔ)存后才能刪除。
3、刪除已經(jīng)儲(chǔ)存的程序:從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇DELET,用《Select》選擇刪除。
4、查看程序的步驟:在主菜單上選擇LIST,按《Proceed》,用《Select》將選擇名稱(chēng),再按《Proceed》,顯示程序的*步,用《Select》鍵向前、向后翻頁(yè)查看,此時(shí)不能改變程序的值。

編輯已有的程序:
1、從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇EDIT,按《Proceed》確認(rèn),用《Select》鍵選擇要編輯的程序,按《Proceed》顯示程序的*步。
2、用《Select》鍵將光標(biāo)移到要改變的溫度或循環(huán)的值上,鍵入新值,按《Proceed》確認(rèn),按《Cancel》刪除鍵入的值,出現(xiàn)空格,鍵入新值后確認(rèn)。
注:一旦值被改變或刪除,原來(lái)的值不能恢復(fù),必須重新鍵入。
3、編輯時(shí)間值:必須重新鍵入小時(shí)、分鐘、秒,按《Proceed》。

 
如何設(shè)置一個(gè)PCR體系:
一般分為8步:
1、預(yù)變性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。
2、變性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。
3、退火:溫度自定,30s~2min。
4、延伸:70~75℃,一般72℃,對(duì)于<2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。
5、循環(huán)數(shù):一般25~35個(gè)循環(huán)。
6、zui終延伸:72℃,5~15min。
7、保存:10℃,時(shí)間設(shè)為0。
8、END。


 
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