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免疫放射分析IRMA與放射免疫分析RIA的異同點

2011年01月15日 09:49:22人氣:6139來源:上海源葉生物科技有限公司

1.標(biāo)記物在RIA中為核素標(biāo)記抗原,在IRMA中為核素標(biāo)記抗體??乖胁煌N類,根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu),標(biāo)記時需用不同的核素和不同的方法??贵w為蛋白質(zhì),有利于碘化標(biāo)記,不同抗體標(biāo)記方法基本相同。標(biāo)記抗體的比活度高,提高了分析的靈敏度。

2.反應(yīng)速率、反應(yīng)速度與反應(yīng)物的濃度成正比,在IRMA中標(biāo)記抗體是過量的,而且不存在競爭性結(jié)合的復(fù)雜反應(yīng),所以反應(yīng)速度較RIA快。在RIA中抗體量是微量的,所以一定要用高親和力的多克隆抗體,而在IRMA中應(yīng)用親和力較低的單克隆抗體也能得到滿意的結(jié)果。

3.反應(yīng)模式RIA為競爭抑制,測得放射性的量與受檢抗原成反比。IRMA為非競爭結(jié)合,劑量與反應(yīng)曲線為正相關(guān)的直線關(guān)系。

4.特異性在單位點IRMA中,一般均應(yīng)用針對不同位點的單克隆抗體,其交叉反應(yīng)率低于應(yīng)用多克隆抗體的RIA。

5.標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作濃度通常RIA的工作范圍為2—3個數(shù)量級,而IRMA可達(dá)3個數(shù)量級以上。

6.分析誤差RIA中加入的抗體和標(biāo)記抗原都是定量的,加樣品誤差可嚴(yán)重影響測定結(jié)果。IRMA中標(biāo)記和固相抗體在反應(yīng)中都是過量的,只有受檢標(biāo)本的加樣誤差才會影響分析結(jié)果。因此,IRMA的批內(nèi)和批間變異均比較小。

7.其他RIA可以測定大分子量與小分子量的物質(zhì),雙位點IRMA只能測定在分子上具有2個以上抗原表位的物質(zhì)。

在RIA中應(yīng)用的多為多克隆抗體,親和力和特異性要求較高,但用量很少。IRMA中標(biāo)記抗體和固相抗體用量較多,一般均用來源豐富、特異性較高的單克隆抗體。

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