合成色素多以苯、甲苯、奈等化工產(chǎn)品為原料制成,經(jīng)過磺化、消化、鹵化等一系列有機(jī)反應(yīng)化合而成，所以幾乎所有的合成色素都不能為人體提供營養(yǎng)物質(zhì)口。但由于合成色素色彩鮮艷、著色力強(qiáng)、穩(wěn)定性好，價(jià)格便宜，深受食品生產(chǎn)商的青睞[2]。  由于合成色素在生物體內(nèi)轉(zhuǎn)化為有害的衍生物，在一定程度上危害人體健康，危害包括一般毒性、致瀉性和致癌性等。很多方法包括前處理只適用于檢測基質(zhì)比較簡單的食品15-16,對于一些蛋白質(zhì)含量高且基質(zhì)復(fù)雜的食品(如:海產(chǎn)品,腌制蔬菜等)卻不能準(zhǔn)確測定其中的含量，而國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009. 35-2003-17方法測定色素，前處理步驟繁瑣，費(fèi)時(shí)，成本高。為了方便監(jiān)測各類不同基質(zhì)的食品中檸檬黃、新紅、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘huo紅和赤蘚紅7種常用色素的含量，本試驗(yàn)建立了同時(shí)檢測以上7種色素的方法,該方法適用于各類不同基質(zhì)的食品,適用范圍廣、準(zhǔn)確、操作簡便、成本低且重復(fù)性好。

一、實(shí)驗(yàn)部分
1.儀器與試劑
  LC600B液相色譜儀，配有G131型二極管陣列檢測器,南京科捷分析儀器公司;G1316A色譜柱恒溫箱;多功能高速離心機(jī)，;高性能分散機(jī)，
  檸檬黃(0.500 mg/ mL)、日落黃(0.500 mg/ mL)、莧菜紅(o.500  mg/mL)、胭脂紅(0.500 mg/mL)、新紅(0.500mg/mL)、赤蘚紅(1.000 mg/mL)、誘huo紅(1.000mg/mL),均購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心;甲醇(色譜純);乙酸銨(進(jìn)口分析純);去離子水(由Milli-Q純化水系統(tǒng)制得)。

2.儀器簡介

LC600B液相色譜儀高壓恒流泵、SPD600B紫外可見可變波長檢測器、SCL600B系統(tǒng)控制器、8725i手動(dòng)進(jìn)樣閥、反控色譜工作站（內(nèi)置反控主機(jī)）、液相色譜柱、微量進(jìn)樣器、進(jìn)樣支架（進(jìn)樣閥用）、*、溶劑過濾器、混合器。

3.樣品處理
稱取粉碎混勻后的樣品5g于25 mL具塞離心管中,加入10 mL 1%氨水的70%乙醇溶液高速勻漿5min，加入檸檬酸溶液,將pH值調(diào)到6~7.置于35 C水浴中超聲提取20 min,在4 000 r/min下離心10 min,收集上清液加人1 g聚酰胺吸附，充分?jǐn)噭?，倒入漏斗進(jìn)行抽濾，用60 C pH=4的去離子水洗滌3次(15 mL/次),然后用甲醇一甲酸(6 : 4），溶液洗滌3次(15 mL/次),再用水洗滌至中性,用乙醇一氨水一水(7:2: 1,v/v/v)溶液解析2~3次(約15 mL/次),收集解析液，于氮吹儀上60 C吹干，加入2mL.水溶解，溶液經(jīng)0.45m微孔濾膜過濾后,HPL.C待測。

4.色譜條件
 色譜柱:Agilent Eclipse plus C1s柱(250 mmX4.6 mn.5 um),流動(dòng)相:D為0.02 mmol/L乙酸氨，C為甲醇。
 梯度程序:0~3.0 min,10%C;3. 0~7.5 min,10%C~65%C;7.5~20.0  min.65%C~98%C;20.0~22.0 min.98%C~10%C;22.0~25.0 min,10%C。
 檢測波長254  nm;流速1.0 mL/min;柱溫30C;進(jìn)樣量10pL

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.方法的線性范圍及檢出限
精密量取1.2.1所述混合標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，逐級稀釋成不同濃度的混合標(biāo)液依次進(jìn)樣分析,在0. 5~20.0 mg/L.質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，以響應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度(mg/L)為橫坐標(biāo),繪制線性曲線。以3倍信噪比時(shí)的質(zhì)量濃度為檢出限，測得7種色素的回歸方程、相關(guān)系數(shù)、方法檢出限(LOD)見表1。加標(biāo)冰淇淋樣品色譜圖如圖2所示。

2.實(shí)際樣品的回收率與精密度
  在上述優(yōu)化試驗(yàn)條件下，對實(shí)際樣品進(jìn)行檢測。分別準(zhǔn)確稱取未檢出本底的紅茶、冰淇淋、腌制黃瓜以及黃魚等4個(gè)檢測樣品各5g.進(jìn)行3個(gè)水平的添加回收實(shí)驗(yàn)，每個(gè)水平做6個(gè)平行樣品，考察方法的回收率和精密度(表2)。從表2中看出，測定不同食品中檸檬黃、新紅、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘huo紅和赤蘚紅的平均回收率為82. 83%~105.39%，變異系數(shù)為1. 10%~8.40%.7種色素均可滿足定量分析要求。