南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司作者
糧食中麥角甾醇含量正相液相色譜法檢測
糧食在生產或儲藏過程中,可能會受到真菌的侵染;隨著真菌侵染程度的加深,糧食將逐步發(fā)生霉變。霉變的食物不僅品質劣變,風味喪失,失去應有的價值。而且容易產生各種各樣的毒素,如AFT、嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、T2毒素、煙曲霉毒素、赭曲霉毒素。這些毒素被人或動物食用后將產生嚴重的危害,如AFT可造成動物的肝臟損傷,有致癌活性,嚴重時可急性致死;玉米赤霉烯酮可造成動物的性早熟而生育能力下降;煙曲霉毒素可導致馬不能正常入睡和原地轉圈;赭曲霉毒素造成動物不進食和進食后發(fā)生嘔吐,即使是微量的毒素也可使動物的免疫機制收到抑制。因此,真菌毒素的產生,不僅會嚴重影響食物安全,還會造成生物成本的增加。準確的知道糧食、食品和飼料是否收到真菌的侵染及侵染是否嚴重到霉變的程度,可以預測糧食、食品和飼料中存在毒素的風險程度,對準確評價這些糧食、食品和飼料的使用或飼用安全程度有著十分重要的意義。
糧食、食品、飼料受真菌侵染的程度的定量分析通常采用微生物技術如平板計數(shù)法及侵染率(種子表明受到真菌侵染的百分比)。這些方法費時,重現(xiàn)性差。平板計數(shù)法zui大的缺陷在于僅反映能生長的霉菌孢子的數(shù)量,而無法評價無孢子形成的菌絲體的數(shù)量。侵染率又難以找到平均樣品,不能滿足快速檢測的需要。
為避免這些缺陷,人們建立化學分析方法;這些方法從霉菌的化學組成入手,如幾丁質含量分析和麥角淄醇含量分析。
幾丁質是真菌細胞壁的組成成分,化學成分為N-乙烯基-D-葡萄糖胺的聚合物, 廣泛存在于真菌菌絲體和真菌孢子之中,也存在于昆蟲外骨骼中,因此專一性較差。幾丁質可以通過酸、堿或酶水解后用比色法分析,分析方法的缺陷是檢測靈敏度低,受雜質的干擾,重現(xiàn)性差;幾丁質也可以用氨基酸分析儀分析,但設備昂貴。
麥角甾醇是真菌細胞膜的組成成分,對真菌細胞膜和其他細胞成分的形成起著重要的作用。麥角甾醇也可以被某些細菌合成,但相對于真菌來說,數(shù)量甚微。植物甾醇主要為β-谷甾醇、豆甾醇及*?;某些禾木科植物含有低濃度的*;由于植物不能合成麥角甾醇或僅有痕量的麥角甾醇形成,因此,麥角甾醇可以作為真菌的*成分進行分析,其含量的多少反映了糧食受真菌侵染的程度,間接反映糧食的品質狀況;又由于麥角甾醇檢測靈敏度高,檢測快捷、簡單,結果準確,其含量多少可以作為糧食食用安全的敏感指標之一,如利用麥角甾醇的含量多少來評價糧食就倉干燥工藝的安全性。
麥角甾醇的分析方法有比色法,氣相色譜法,紅外光譜法,紫外光譜法及液相色譜法。由于液相色譜法的快速、準確、重現(xiàn)性好而被各國專家普遍采用;如澳大利亞的喬治教授采用固相萃取技術及液相色譜分離技術檢測麥角甾醇的含量,以控制就倉干燥的工藝。考慮到我嗎、國的國情,要將麥角甾醇的檢測技術在我國推廣應用,必須具備檢測成本低,檢測快速,結果準確,方法通用性強等特點;因此,我們參照AOAC的麥角甾醇的檢測技術及其它資料介紹的甾族化合物檢測技術,經(jīng)比較研究之后,建立了一種快速、簡單、準確、通用的麥角甾醇的檢測方法。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
色譜條件:
流動相 | 正己烷/異丙醇=99/1(V/V),2.0mL/min |
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檢測波長 | 282nm,0.1000AUFS |
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測定結果:
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型號:BN-YX800
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型號:ADT30A-CD4
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