上海通蔚生物科技有限公司作者
產(chǎn)品功能和應(yīng)用領(lǐng)域,明確產(chǎn)品的主流用戶和非主流用戶,特別是網(wǎng)上銷售的主要客戶對(duì)象檢測檢疫局,食品加工場,進(jìn)出口的食品檢測,各大高校,進(jìn)出口的檢測檢疫,食品安全檢測ELISA試劑盒的操作原理: ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。ELISA的操作步驟:樣品收集保存、試劑準(zhǔn)備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標(biāo)抗體、終止反應(yīng)、結(jié)果判定、 影響因素:
分子量、穩(wěn)定性、純化、包被濃度,抗體純度和產(chǎn)品質(zhì)量盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單,但有可能會(huì)影響測定結(jié)果的因素卻較多,分布在測定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因,特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。
臨床ELISA測定中可能會(huì)出現(xiàn)的問題及可能的原因問題可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質(zhì)控樣本檢測不出溫育的時(shí)間或溫度不夠;顯色反應(yīng)時(shí)間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測定的重復(fù)性差(相同樣本兩次測定結(jié)果不一致)這是典型的由測定操作引起的問題,包括(1)加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;(2)加樣過快,孔間發(fā)生污染;(3)加錯(cuò)樣本;(4)加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);(5)不同批號(hào)試劑盒中組分混用;(6)溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;(7)孔內(nèi)污染雜物;(8)酶標(biāo)儀濾光片不正確;(9)血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
3.白板(陽性對(duì)照不顯色)(1)漏加酶結(jié)合物;(2)洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。(3)漏加顯色劑A或B;(4)終止劑當(dāng)顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色(1)洗板不干凈;(2)顯色液變質(zhì);(3)加底物的吸光受酶污染;(4)洗板液受酶等污染。 關(guān)鍵參數(shù)和功能幅度,相應(yīng)的性價(jià)關(guān)系
對(duì)于食品檢測ELISA試劑盒來說,國產(chǎn)的試劑盒在中國市場上比進(jìn)口的試劑盒占的份額要大,進(jìn)口的食品檢測ELISA試劑盒主要是在通用性試劑盒上面,國產(chǎn)的PCR試劑盒是在檢測各種天然毒素上面。
就市場上比較早食品檢測ELISA進(jìn)口的主要是:R-biopharm、Neogen國產(chǎn)的試劑盒主要是:達(dá)安基因檢測,在價(jià)格也較貴,近來幾年市面上生產(chǎn)此類食品檢測ELISA檢測試劑盒的公司成長迅速,在中國市面上占份額大的幾個(gè)公司:長少安迪、深圳綠詩源、三方圓、安圖,科華,索奧等這幾個(gè)公司是的食品檢測ELISA試劑盒產(chǎn)品比較多,但是有很多以前做酶免檢測試劑盒的公司也正在進(jìn)入食品安全檢測這個(gè)市場。
一般性食品檢測ELISA試劑盒的操作比較簡單,不需要生產(chǎn)商去上門指導(dǎo),而且實(shí)驗(yàn)的成功率也大。食品檢測ELISA試劑盒試劑已經(jīng)成熟,穩(wěn)定性好,在食品領(lǐng)域中的應(yīng)用還在擴(kuò)大;一般在試劑盒出現(xiàn)問題的試劑,只要提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告和以及殘留試劑,經(jīng)廠家鑒定確實(shí)屬于試劑本身問題的,可以提供退換貨服務(wù)。
酶免試劑盒要低溫運(yùn)輸,(2-8攝氏度),長期保存要在-20攝氏度分裝保存(防止反復(fù)凍融影響酶的活性),長期保存做好在2-8攝氏度 。
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