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人Follistatin-like1(FSL1)ELISA試劑盒使用說明書

2010年06月24日 15:05:55人氣:635來源:廈門慧嘉生物科技有限公司

 

Follistatin-like1(FSL1)ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱:
通用名:人Follistatin-like1(FSL1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中Follistatin-like1(FSL1)含量。
實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中人Follistatin-like1(FSL1)水平。用純化的人Follistatin-like1(FSL1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的Follistatin-like1(FSL1)標準品和未知濃度的FSL1待檢樣品,溫育后,加入*標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Follistatin-like1(FSL1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人Follistatin-like1(FSL1)濃度。
試劑盒組成

1
20倍濃縮洗滌液
50ml×1瓶
 
 
9
標準品S1(30ng/L)
0.5ml×1瓶
2
鏈霉親和素-HRP
6ml×1瓶
標準品S2(20ng/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
標準品S3(10ng/L)
0.5ml×1瓶
4
*標記的抗-IgG抗體
6ml×1瓶
標準品S4(5ng/L)
0.5ml×1瓶
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
標準品S5(2.5ng/L )
0.5ml×1瓶 
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
10
密封袋
1個
7
終止液
6ml×1瓶
11
封板膜
3張
8
樣品稀釋液
6ml×1瓶
12
說明書
1份

 
標本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
操作步驟
1.       根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
2.       加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品,*標記的抗-IgG抗體,鏈霉親和素-HRP,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。然后在標準品孔中加入標準品50μl,在樣本反應孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl(樣品zui終稀釋度為5倍),蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
3.       配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4.       洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。
5.       加*標記的抗-IgG抗體:每孔加入*標記的抗-IgG抗體50μl(空白孔除外)。37℃溫育30分鐘
6.       洗滌:操作同4。
7.       加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP(空白孔除外),輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
8.       洗滌:操作同4。
9.       顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.   終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.   測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
 
計算
  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
線形范圍:
1.5ng/L -40ng/L  
規(guī)格:
96人份/盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8。
2.有效期:6個月
 
廈門慧嘉生物科技有限公司專業(yè)代理眾多生命科學領域的。致力于各種ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、一抗二抗、細胞因子、生物試劑、移液器、耗材的銷售推廣及服務工作。
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