上海通蔚生物科技有限公司作者
普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)是以溫和噬菌體為載體,將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),使受體菌獲得新的性狀,如轉(zhuǎn)移的DNA是供體菌染色體上的任何部分,則稱為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo).
在普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)中,噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給體染色體的任何部分到受體細(xì)胞中
?。╣eneralized transduction)
一、發(fā)現(xiàn)
1951年,Joshua Lederberg和Norton Zinder為了證實(shí)大腸桿菌以外的其它菌種是否也存在接合作用,用二株具不同的多重營(yíng)養(yǎng)缺陷型的鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行類似的實(shí)驗(yàn),他們發(fā)現(xiàn)二株?duì)I養(yǎng)缺陷型混合培養(yǎng)后確實(shí)產(chǎn)生了約10-5的重組子,又一次成功地證實(shí)了該菌中存在的重組現(xiàn)象。但當(dāng)他們沿著發(fā)現(xiàn)接合作用的思路繼續(xù)用“U”型管進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)時(shí),驚奇地發(fā)現(xiàn):在給體和受體細(xì)胞不接觸的情況下,同樣出現(xiàn)原養(yǎng)型細(xì)菌。幸運(yùn)的是他們的混合實(shí)驗(yàn)中,所用的沙門氏菌LT22A是攜帶P22噬菌體的溶源性細(xì)菌,另一株是非溶源性細(xì)菌,因此結(jié)果的解釋必然集中到可透過“U”型管濾板的P22噬菌體,推測(cè)是它們進(jìn)行著基因的傳遞。 經(jīng)過后來進(jìn)一步的對(duì)可過濾因子的研究和比較獲得證實(shí),從而發(fā)現(xiàn)了這一重要的基因轉(zhuǎn)移途徑。這是一個(gè)表面看起來的常規(guī)研究卻導(dǎo)致一個(gè)驚奇和十分重要發(fā)現(xiàn)的重要例證之一。
二、轉(zhuǎn)導(dǎo)模型
圖8-19顯示P22介導(dǎo)的的基本過程。從圖中可以看到,由給體細(xì)胞可產(chǎn)生二種類型的子代病毒,其中一種(右邊,約10-6-10-8)病毒顆粒內(nèi)包含的不是病毒DNA而是給體細(xì)胞的染色體DNA,這種病毒稱轉(zhuǎn)導(dǎo)顆?;蜣D(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體,由它們感染受體細(xì)胞后,將給體的DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞,通過同源重組形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子。那么轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體為什么“錯(cuò)”將 宿主的DNA包裹進(jìn)去了呢?研究表明,這與噬菌體的包裝機(jī)制有關(guān),圖8-20表示P22噬菌體DNA的包裝機(jī)制:進(jìn)入細(xì)胞的P22DNA經(jīng)環(huán)化(冗余末端之間重組)和滾環(huán)復(fù)制形成一個(gè)多聯(lián)體(co ncatemer)分子。DNA的包裝從基因組的一個(gè)特殊位點(diǎn)(pac,package)開始,用噬菌體編碼的酶按順序進(jìn)行切割,并以“headful”的長(zhǎng)度進(jìn)行包裝,如此同時(shí),該酶也能識(shí)別染色體DNA上類似pac的位點(diǎn)并進(jìn)行切割,以“headful”的包裝機(jī)制包裝進(jìn)P22噬菌體外殼,形成只含宿主DNA的轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體顆粒。但這種“錯(cuò)裝”機(jī)率很?。?0-6-10-8),因?yàn)槿旧?體上的pac與P22 DNA的pac序列不*相同,利用效率較低。形成轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒的噬菌體可以是溫和的也可以是烈性的,主要的要求是具有能偶爾識(shí)別宿主DNA的包裝機(jī)制并在宿主基因組*降解以前進(jìn)行包裝。
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