豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒(公司免費(fèi)提供代測(cè)服務(wù)及技術(shù)指導(dǎo))
產(chǎn)品英文名稱:PorcineVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品分類:豬ELISA試劑盒
保存條件:2-8℃
豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒使用方法:
1.血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5.保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更
高的溫度加熱解凍,應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測(cè)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中代測(cè)指標(biāo)水平。用純化的代測(cè)指標(biāo)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入代測(cè)指標(biāo),再與HRP標(biāo)記的代測(cè)指標(biāo)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的代測(cè)指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中代測(cè)指標(biāo)含量。
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