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傳代細(xì)胞培養(yǎng)與觀察實(shí)驗(yàn)原理
傳代培養(yǎng)是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。
這種培養(yǎng),*步也是制備細(xì)胞懸液,當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層時(shí),它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破壞。所以—般采用*和EDTA(乙二胺四乙酸鹽)的混合物,做為消化液。
細(xì)胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞能在體外長(zhǎng)期生長(zhǎng),必須滿(mǎn)足兩個(gè)基本要求:一是供給細(xì)胞存活所必需的條件,如適量的水、無(wú)機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(zhǎng)因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度和滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴(yán)格控制無(wú)菌條件。
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