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免疫組化的作用有哪些?

時間:2013-7-19閱讀:563
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       由于免疫組化具有特異性強、靈敏度高、定位準確等特點,且能將形態(tài)研究與功能研究有機地結(jié)合在一起,所以,這門新技術(shù)已被廣泛地應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的許多領(lǐng)域。在病理學(xué)研究中,免疫組化技術(shù)的作用和意義更為重要。以腫瘤研究為例,在免疫組化技術(shù)出現(xiàn)以前,對腫瘤的診斷和分類還局限于細胞水平,而引入免疫組化技術(shù)后,則使研究的深度提高到了生物化學(xué)水平、分子水平。近年來,伴隨基因探針研究而興起的核酸分子原位雜交技術(shù)也正在蓬勃發(fā)展,更使免疫組化如虎添翼,兩者相得益彰,將研究推進到了基因水平。

1、確定細胞類型
通過特定抗體標記出細胞內(nèi)相應(yīng)抗原成分,以確定細胞類型。如角蛋白是上皮性標記,前列腺特異性抗原僅見于前列腺上皮,甲狀腺球蛋白抗體是甲狀腺濾泡型癌的敏感標記,而降鈣素抗體是甲狀腺髓樣癌的*標記。有些細胞(如表皮內(nèi)朗格漢斯細胞、黑色素細胞、淋巴結(jié)內(nèi)指突狀和樹突狀網(wǎng)織細胞)光鏡下不易辨認,但免疫組化標記(S-100蛋白等)能清楚顯示其形態(tài)。
2、辨認細胞產(chǎn)物
利用某些細胞產(chǎn)物為抗原制備的抗體,可作為相應(yīng)產(chǎn)物的特殊標記,如內(nèi)分泌細胞產(chǎn)生的各種激素,大多數(shù)可用免疫組化技術(shù)標記出來,據(jù)此可對內(nèi)分泌腫瘤作功能分類,檢測分泌異位激素的腫瘤等。
3、了解分化程度
大多數(shù)標記物都有其特定的分布部位,如上皮細胞膜抗原(EMA)著色部位在細胞膜上,但差分化乳癌胞漿內(nèi)也可出現(xiàn)陽性顆粒;角蛋白的含量也與分化程度有關(guān),低分化或未分化癌含量較低、染色較弱。
4、鑒定病變性質(zhì)
通過標記Ig輕鏈(κ、λ)可區(qū)分部分B細胞性淋巴瘤與B細胞反應(yīng)性增生,前者常表達單一的Ig輕鏈(κ+/λ+),后者常為多克隆Ig輕鏈(κ+、λ+)。而標記Bcl-2蛋白在區(qū)別濾泡型淋巴瘤和反應(yīng)性濾泡增生上有相當?shù)囊饬x。在濾泡型淋巴瘤,90%以上腫瘤性濾泡細胞有bcl-2的高表達;而在濾泡反應(yīng)性增生時,濾泡反應(yīng)中心的細胞不表達Bcl-2蛋白,而套細胞則表達。
5、發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶
某些癌的早期轉(zhuǎn)移有時與淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細胞增生不易區(qū)別。用常規(guī)病理組織學(xué)方法要在一個組織中認出單個轉(zhuǎn)移性腫瘤細胞或幾個細胞是不可能的,而采用免疫組化方法(如用上皮性標志)則十分有助于微?。ò┺D(zhuǎn)移灶的發(fā)現(xiàn)。對轉(zhuǎn)移性腫瘤也可借助免疫組化標志尋找原發(fā)瘤,如骨組織內(nèi)有前列腺特異性抗原陽性細胞,提示前列腺癌轉(zhuǎn)移。
6、探討腫瘤起源或分化表型
一些來源不明的腫瘤長期爭論不休,zui后通過免疫組化標記取得共識。如顆粒性肌母細胞瘤,曾被認為是肌源性的,但該腫瘤肌源性標記陰性,而神經(jīng)性標記陽性,證明為神經(jīng)來源(可能來自神經(jīng)鞘細胞)。分化很差的腫瘤病理上常按細胞形態(tài)分為梭形細胞腫瘤、小圓細胞腫瘤等,通過多種標記的聯(lián)合應(yīng)用,也可能確定來源。
7、確定腫瘤分期
判斷腫瘤是原位還是浸潤及有無血管、淋巴管侵襲與腫瘤分期密切相關(guān)。用常規(guī)病理方法判斷有時是十分困難的,但用免疫組化法可獲得明確結(jié)果。如采用層粘連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可清楚顯示基底膜的主要成分,一旦證實上皮性癌突破了基底膜,就不是原位癌,而是浸潤癌了,其預(yù)后是不同的。用第八因子相關(guān)蛋白、荊豆凝集素等顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細胞的標記物則可清楚顯示腫瘤對血管或淋巴管的浸潤。對許多腫瘤的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤,這是主要的鑒別依據(jù),同時也有治療及預(yù)后意義。
8、指導(dǎo)治療和預(yù)后
免疫組化標記中與預(yù)后有關(guān)的標記大致可分為三類:①類固醇激素受體:如雌激素受體、孕激素受體等,它們與乳腺癌的關(guān)系已獲*,性激素受體陽性者內(nèi)分泌治療效果較好,預(yù)后也較好。相似的結(jié)果也見于子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌。②腫瘤基因標記:如癌基因c-erB-2,c-myc,P53蛋白等,在腫瘤中高度表達者,患者預(yù)后較差;而nm23蛋白高度表達者,腫瘤轉(zhuǎn)移率較低,預(yù)后較好。③細胞增殖性標記:如表皮生長因子受體(EGFR)、增殖細胞核抗原(PCNA)、Ki-67等,表達指數(shù)越高,表明其增殖越活躍,惡性度增高,預(yù)后不良,其中以惡性淋巴瘤、乳腺癌較為明顯。而且在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、 PCNA 、EGFR陽性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,并與激素受體的表達呈負相關(guān)。
9、輔助疾病診斷和分類
人體的免疫性疾病,主要是自身免疫性疾病,如腎小球腎炎、皮膚自身免疫性疾病等,可用免疫組化方法對組織細胞內(nèi)的免疫球蛋白、補體、免疫復(fù)合物等進行檢測以輔助診斷。某些疾病的分類或分型也是在免疫組化基礎(chǔ)上建立的。內(nèi)分泌腫瘤如垂體前葉腺瘤,根據(jù)其分泌功能可分為生長激素腺瘤、泌乳激素腺瘤等10型;胰島細胞瘤的功能分類為胰島素瘤、高血糖素瘤等6種;惡性淋巴瘤根據(jù)瘤細胞表面標志不同可分為T細胞性、B細胞性。腎小球腎炎的免疫學(xué)分類亦需免疫組化或免疫熒光技術(shù)。
10、尋找感染病因
人體疾病的致病微生物中有的在常規(guī)病理檢查中不易發(fā)現(xiàn),尤其是病毒性致病微生物,由于其分子水平的結(jié)構(gòu),在細胞水平上難以發(fā)現(xiàn),通過免疫組化方法則可明確發(fā)現(xiàn)病原體抗原部位以及定量,如巨細胞病毒(CMV)、人乳頭狀瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)等,已有商品化標志物幫助解決病因診斷問題。
 

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