Mo-MuLV感染的3T3培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)（laminarflow）以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)Mo-MuLV感染的3T3無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無(wú)菌區(qū)域，勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。

小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來(lái)自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無(wú)菌操作臺(tái)（至少ClassⅡ）。操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。

定期檢測(cè)下列項(xiàng)目：5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無(wú)菌水，每周更換）。5.3.無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)之airflow壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA過(guò)濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。6.水槽可添加消毒劑（Zephrin:750），定期更換水槽的水

 粉末培養(yǎng)基配制好后（加了血清），一般在4度盡量不要超過(guò)個(gè)月，如在-20度存放時(shí)間可長(zhǎng)一些，但也不要超過(guò)3-4個(gè)月，可能對(duì)于永生化細(xì)胞株來(lái)說(shuō)要求不是太高，細(xì)胞嬌弱，放置時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。

 開(kāi)紫外線照射臺(tái)的時(shí)候，就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后，溫度也升上來(lái)了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生，有的常年不清洗，里面很臟，容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后，找個(gè)毛巾擦干上面的水。

細(xì)胞 停滯期（Stagnate phase） 細(xì)胞數(shù)量達(dá)到飽和密度后，如不及時(shí)進(jìn)行傳代，細(xì)胞就會(huì)停止增殖，進(jìn)入停止期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)持平，故也稱平臺(tái)期（Plateau phase）。停滯期細(xì)胞雖不增殖，但仍有代謝活動(dòng)。如不進(jìn)行分離傳代，細(xì)胞會(huì)因培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒，出現(xiàn)形態(tài)改變，貼壁細(xì)胞會(huì)脫落，嚴(yán)重的會(huì)發(fā)生死亡，因此，應(yīng)及時(shí)傳代。
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鄰聯(lián)茴香胺鹽suan"鹽，聯(lián)大茴香胺鹽suan"鹽，3,3’-二甲氧基聯(lián)ben"胺鹽suan"鹽，聯(lián)大回香胺鹽suan"鹽，快藍(lán)B，二鹽suan"鄰聯(lián)茴香胺，o-Dianisidine dihydrochloride
莧菜紅，suan"性紅7，萘酚紅，偶氮品紅S，-（4′-磺基-′-萘偶氮）--萘酚-3，6-二磺suan"三鈉鹽，雞冠花紅，藍(lán)光suan"性紅，對(duì)磺基萘偶氮-R-鹽，Amaranth
紫脲suan"銨，氨基紫色suan"，紅紫suan"銨，骨螺紫，紫尿suan"胺，5，5′-次氮基二巴比土suan"銨鹽，Murexide
鄰甲，鄰甲酚呋酞， -甲, 3,3′-二甲基，3,3-雙（4-羥基-3-甲基ben"基）-（3H）-異ben"并呋喃酮，o-Cresolphthalein
鄰甲絡(luò)合劑，N,N'-[（3-氧代-（3H）-異ben"并呋喃基亞基]雙[（6-羥基-5-甲基-3,-亞ben"基）亞甲基]雙[N-（羧基甲基）甘氨suan"]，酞紫，金屬酞，紫，-甲絡(luò)合劑，3',3''-雙[[雙（羧甲基）氨基]甲基]-5', 5''-二甲基，o-Cresolphthalein complexon