人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白（aFABP）ELISA試劑盒（elisa kit）
 中文簡稱:人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒   英文簡稱：（aFABP）ELISA KIT

ELISA試劑組成
1．抗原 在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
2．抗體 在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體（多抗）和單克隆抗體（單抗）。多抗取白免疫動物的抗血清，制備較簡單，但抗血清成分復(fù)雜，除含針對抗原（多個表位）的抗體外，還含有多種其他抗體，親和力和特異性相對要低于單抗，且制備周期長，批間差異較大。
3．酶和底物 在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP
（1）HRP：是一種糖蛋白，含糖量約18％，分子量為44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。（2）ALP：是一種磷酸酯的水解酶，用做示蹤酶的ALP活性應(yīng)在l 000U／mg以上。
4．固相載體 固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段，應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
5．包被 將免疫活性物質(zhì)（抗原或抗體）結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-*間接包被法。

ELISA測定步驟
人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白（aFABP）ELISA試劑盒（elisa kit）測定時一般需經(jīng)過以下步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個方面。
1．隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動，因此有必要對標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，例如對血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋，或離心分離血脂等。間接法測定中，標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2．加樣一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3．在成批手工檢測中，還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*，對競爭法及定量檢測影響很大，不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4．洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物，終止抗原抗體反應(yīng)，除去標(biāo)本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)?？捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板，前者洗滌質(zhì)量較好，各反應(yīng)孔洗滌效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果，差異不宜太大。
5．準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀（酶標(biāo)儀），比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值（A值）。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。

ELISA試劑展示
人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白（aFABP）ELISA試劑盒（elisa kit）
       K0086 霉酚酸/麥考酚酸/E-4-甲基-6-（1,3-二氫-7-甲基-4-羥基-6-甲氧基-3-氧代-5-異苯并呋喃基）-4-己烯酸/Mycophenolic acid 　 K0087 硫酸*/Paromomycin sulfate salt 　 　 K0088 腐草霉素/Phleomycin from Streptomyces verticillus 　 K0089 井岡霉素/有效霉素/N-[（1S）-（1,4,6/5）-3-羥甲基-4,5,6-三羥基-2-環(huán)已烯基][O-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→3）]1S-（1,2,4/3,5）-2,3,4-三羥基-5-羥甲基環(huán)已基胺/井崗霉素/Validamycin 　 K0090 硝酸*/氯苯咪唑/1-[2-[（4-）甲氧基]-2-（2,4-二基）乙基]-1H-咪唑/1-[2,4-二氯-2-（4-氯芐氧基）苯乙基]咪唑硝酸鹽/Econazole nitrate 　 K0091 */甲硝噠唑/2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-乙醇/滅滴靈/2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇/1-（2-羥乙基）-2-甲基-5-硝基咪唑/硝基羥乙唑/Metronidazole 　 K0092 */氟呱酸/*/1-乙基-6-氟-1，4-二氫-4-氧代-7-（1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸/Norfloxacin 　 　 K0094 */蒽諾沙星/*/1-環(huán)丙基-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-6-氟-1，4-二氫-4-氧代-3-喹啉羧酸/1-環(huán)丙基-6-氟-1,4-二氫-4-氧-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸/恩氟沙星/恩羅*/恩羅沙星/Enrofloxacin 　 　  

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