建立*(norfloxacin,Nor)免疫檢測試劑盒。

【方法】基于所制備的*單克隆抗體,通過矩陣法篩選*抗體工作濃度和二抗工作濃度,建立*間接競爭ELISA試劑盒(Nor-kit),并對(duì)其性能進(jìn)行了鑒定和確證。

【結(jié)果】Nor-kit的平均IC50為5.18μg.L-1,靈敏度為0.31μg.L-1,檢測限為1.00μg.L-1。試劑盒除了和*反應(yīng)外,還和同系物中的培氟沙星、*、*、*及惡喹酸有不同程度的交叉反應(yīng)。奶樣中回收率平均為103.23%,變異系數(shù)(CV)為9.33%。3個(gè)不同批次試劑盒的測定結(jié)果中,批內(nèi)變異系數(shù)小于10%,且批間變異系數(shù)也小于10%;在4℃保存條件下,試劑盒可以保存6個(gè)月而質(zhì)量不變。奶樣添加回收試驗(yàn),試劑盒與LC-MS/MS測定結(jié)果沒有顯著差異(P≥0.05);而且檢測實(shí)際生產(chǎn)中鮮奶樣時(shí),試劑盒與LC-MS/MS測定結(jié)果也無顯著差異(P≥0.05)。

【結(jié)論】本研究成功研制出靈敏、特異、簡便的*殘留檢測ELISA試劑盒。