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大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒產(chǎn)品

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大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒產(chǎn)品

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-水平。用純化的大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-再與HRP標(biāo)記的肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-濃度。
試劑盒組成

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品(80μg/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×8條
9
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說(shuō)明書(shū)
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張 
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個(gè)

標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
3.組織處理:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒產(chǎn)品

操作步驟

1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

40μg/L
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20μg/L
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10μg/L
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5μg/L
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5μg/L
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒產(chǎn)品相關(guān)產(chǎn)品:

Anti-HCV-NS1/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS1抗體IgG
Anti-HCV-NS3/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS3抗體IgG
Anti-HCV-NS4a/FITC  熒光素標(biāo)記丙型肝炎病毒-NS4a抗體IgG
Anti-HDAC1/HD1/FITC  熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶1抗體IgG
Anti-HDAC2/HD2/FITC   熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?;?抗體IgG
Anti-HDAC3/HD3/FITC   熒光素標(biāo)記組蛋白去乙酰化酶3抗體IgG
Anti-Scavenging Receptor SR-BI/FITC  熒光素標(biāo)記高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體IgG
Anti-Heamachrome/FITC  熒光素標(biāo)記血紅素抗體IgG
Anti-HER2 receptor(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體(N端)IgG
Anti-HER2 receptor(NT)/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體(N端)IgG
Anti-HER2 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗HER2受體抗體IgG
Anti-HER2 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記抗c-erbB-2受體抗體IgG
Anti-HERG/FITC   熒光素標(biāo)記特異性鉀離子通道蛋白抗體IgG
Anti-HEV/FITC  熒光素標(biāo)記戊型肝炎病毒抗體IgG
Anti-Melamine/Gold  金標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgG(10及15nm)
Anti-HGF/FITC  熒光素標(biāo)記肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體IgG
Anti-HGV/FITC  熒光素標(biāo)記庚型肝炎病毒抗體IgG
Anti-hHb/FITC  熒光素標(biāo)記小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體IgG
Anti-HHV4/EBV/FITC  熒光素標(biāo)記人類(lèi)皰疹病毒4抗體IgG


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