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大鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)ELISA試劑盒供應(yīng)商

閱讀:2544發(fā)布時(shí)間:2013-09-11

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大鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)ELISA試劑盒供應(yīng)商

 

使用目的:

本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核因子kb受體活化因子配體( RANKL含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠核因子kb受體活化因子配體( RANKL水平。用純化的大鼠核因子kb受體活化因子配體( RANKL抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體( RANKL),再與HRP標(biāo)記的核因子kb受體活化因子配體( RANKL抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體( RANKL呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠核因子kb受體活化因子配體( RANKL濃度。

 

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

800 pmol/L
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400 pmol/L
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pmol/L
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pmol/L
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 pmol/L
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

大鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)ELISA試劑盒供應(yīng)商相關(guān)產(chǎn)品:

 

Anti-WEE1 protein  WEE1蛋白抗體
Anti-WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4)  一種新的*/*激酶家族成員的基因WNK4抗體
Anti-WNK3 protein(Serine/threonine-protein kinase WNK3)  */*激酶家族成員的基因WNK3抗體
Anti-Wnt1  信號(hào)通路Wnt1抗體
Anti-WDR26/MIP2   心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體
Anti-Wnt3a  信號(hào)通路Wnt3a抗體
Anti-WIP1(WPP-DOMAIN INTERACTING PROTEIN 1)  原癌基因WIP1抗體
Anti-WNT9A/WNT14(wingless-type MMTV integration site 9A)  信號(hào)通路Wnt9a抗體
Anti-WNT2B  信號(hào)通路Wnt2B抗體
Anti-WNT(wingless-related MMTV integration site )  信號(hào)通路Wnt抗體
Anti-WNT10A(wingless-type MMTV integration site family, member 10a)  信號(hào)通路WNT10A抗體
Anti-WRCH-1(Wnt-1 responsive Cdc42 homolog 1)  WRCH1抗體
Anti-WWOX (WW domain-containing oxidoreductase)  包含氧化還原酶的WW域抗體
Anti-YBX-1(Y box-binding protein1)  高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體
Anti-YERSINIA PESTIS, mouse monoclonal antibody  鼠抗鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體
Anti-XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein)  X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體
Anti-YY1(Yin Yang1)  核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體
Anti-XAF1(XIAP-associated factor 1)  XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體
Anti-XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1)  X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗體
Anti-XBP-1(X box binding protein 1)  細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X(jué)盒結(jié)合蛋白抗體
Anti-ZAP-70(zeta-associated protein 70)  zeta相關(guān)蛋白70抗體

 

大鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)ELISA試劑盒供應(yīng)商

 


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