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牛布氏桿菌(brucellosis)Elisa試劑盒技術標準

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牛布氏桿菌(brucellosis) 操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
240pg/ml 5 號標準品 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
120pg/ml 4 號標準品 150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
60pg/ml 3 號標準品 150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30pg/ml 2 號標準品 150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15pg/ml 1 號標準品 150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測樣品 10 µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。

 

牛布氏桿菌(brucellosis) 試劑盒組成   

1  30倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶 

2  酶標試劑  6ml×1 瓶  8  標準品(480pg/ml)  0.5ml×1 瓶 

3  酶標包被板  12孔×8 條  9  標準品稀釋液  1.5 ml×1 瓶 

4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份 

5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11   封板膜  2 張     

6  顯色劑 B 液  6ml×1/ 瓶  12  密封袋  1 個

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