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技術(shù)文章

博研生物:大鼠表皮生長因子(EGF)

閱讀:498發(fā)布時間:2012-12-19

大鼠表皮生長因子(EGF)試劑盒組成 

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)品(960pg/ml

0.5ml×1

3

標(biāo)包被

12孔×8

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

大鼠表皮生長因子(EGF)標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

大鼠表皮生長因子(EGF)操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

480pg/ml

5號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

240pg/ml

4號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

120pg/ml

3號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

60pg/ml

2號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

30pg/ml

1號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

大鼠表皮生長因子(EGF)相關(guān)產(chǎn)品:

BYS12087B 大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒
BYS12088B 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
BYS12089B 大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒
BYS12090B 大鼠*(cAMP)ELISA試劑盒
BYS12091B 大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
BYS12092B 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
BYS12093B 大鼠雌激素(E)ELISA試劑盒
BYS12094B 大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
BYS12095B 大鼠游離β絨毛膜*(f-βCG)ELISA試劑盒
BYS12096B 大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒
BYS12097B 大鼠*(NA)ELISA試劑盒
BYS12098B 大鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒
BYS12099B 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒
BYS12100B 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒
BYS12101B 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
BYS12102B 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
BYS12103B 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒
BYS12104B 大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒
BYS12105B 大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒


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