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雞水通道蛋白5ELISA試劑盒操作原理
點擊次數(shù)：616 發(fā)布時間：2012-7-3
Agre等（1988）在分離純化紅細(xì)胞膜上的Rh多肽時，發(fā)現(xiàn)了一個28kD的疏水性跨膜蛋白，稱為形成通道的整合膜蛋白28（channel-forminginte—gralmembraneprotein，CHIP28），1991年完成了其cDNA克?。╒erkman，2003）。但當(dāng)時并不知道該蛋白的功能，在進(jìn)行功能鑒定時，將體外轉(zhuǎn)錄合成的CHIP28eDNA注入非洲爪蟾的卵母細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)在低滲溶液中，卵母細(xì)胞迅速膨脹，并于5min內(nèi)破裂。為進(jìn)一步確定其功能，又將其構(gòu)于蛋白磷脂體內(nèi)，通過活化能及滲透系數(shù)的測定及后來的抑制劑敏感性等研究，證實其為水通道蛋白。從此確定了細(xì)胞膜上存在轉(zhuǎn)運水的特異性通道蛋白，并稱CHIP28為Aquaporinl（AQPl）。
水通道蛋白即蛋白質(zhì)在膜內(nèi)，形成專門輸送水的穿膜通道，存在于紅細(xì)胞和腎組織中，由4和腎組織中，由4個相同的亞基組成，每個亞基（28kDa）含個亞基（28kDa）含6個穿膜α穿膜α螺旋，極大地增加膜的水通透性。
水通道蛋白是專門運輸水的跨膜蛋白，其基因結(jié)構(gòu)、基因表達(dá)調(diào)控、染色體定位、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、組織分布和生理功能得到了較為深入的研究。到目前為止，在哺乳動物至少發(fā)現(xiàn)有13種到目前為止，在哺乳動物至少發(fā)現(xiàn)有13種水通道蛋白，即AQPo～12（Preston等，水通道蛋白，即AQPo～12（Preston等，1992）
生物體的主要組成部分是水溶液，水溶液占人體重量的70％。生物體內(nèi)的水溶液主要由水分子和重量的70％。生物體內(nèi)的水溶液主要由水分子和各種離子組成。它們在細(xì)胞膜通道中的進(jìn)進(jìn)出出可以實現(xiàn)細(xì)胞的很多功能。
雞水通道蛋白5,佛山雞水通道蛋白5ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞水通道蛋白5水平。用純化的雞水通道蛋白5抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入水通道蛋白5，再與HRP標(biāo)記的水通道蛋白5抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的水通道蛋白5呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中雞水通道蛋白5濃度。
另外，利用不同的細(xì)胞膜通道，可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能，從而達(dá)到治療疾病的目的。中藥的一個重要功能是調(diào)節(jié)人體體液的成中藥的一個重要功能是調(diào)節(jié)人體體液的成分和不同成分的濃度，這些成分可以通過不同細(xì)胞膜通道調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能。有專家認(rèn)為，對細(xì)胞膜通道的研究可以為揭示中認(rèn)為，對細(xì)胞膜通道的研究可以為揭示中醫(yī)藥的科學(xué)原理提供重要的途徑。醫(yī)藥的科學(xué)原理提供重要的途徑。