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山羊超氧化物歧化酶ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù)：427 發(fā)布時(shí)間：2012-10-11
產(chǎn)品類(lèi)型：ELISA試劑盒
大小：96T
種類(lèi)：山羊
目標(biāo)名稱(chēng)：
超氧化物歧化酶，可溶性
檢測(cè)時(shí)間：1-5H
樣品體積：50-100ul
檢測(cè)wavelengt：450nm處
采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。為SOD1的特定抗體已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何的SOD1目前的固定抗體的約束。*共軛的抗體特異性的SOD1除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，加入到孔中?？?蛋白共軛的辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經(jīng)過(guò)洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的SOD1。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度。
在使用前，將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)定一式兩份。
1。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑，密封保鮮袋，將未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí)，在37℃下一盤(pán)布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
4。每孔中取出的液體，不洗。
5。向每孔中加入100μl*抗體（1倍）。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí)，在37℃下（*抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案。）
6。吸液的各孔和洗滌，共洗滌三次重復(fù)該過(guò)程兩次。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí)，在37℃下
8。重復(fù)的愿望/洗滌過(guò)??程中，在步驟6的5倍。
9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘，在37℃下避光
10。一站式解決方案，每孔加入底物，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合。
11。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接，可能會(huì)比較高，不太準(zhǔn)確。
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