. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1. 掌握DNA指紋圖譜技術(shù)的概念、原理和基本操作過(guò)程
2. 學(xué)習(xí)DNA的限制性酶切的基本技術(shù)
3. 掌握瓊脂糖凝膠電泳的基本操作技術(shù),學(xué)習(xí)利用瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定DNA段的長(zhǎng)度,并能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。
二. 實(shí)驗(yàn)原理
1984年英國(guó)萊斯特大學(xué)的遺傳學(xué)家Jefferys及其合作者將分離的人源小衛(wèi)星DNA用作基因探針,同人體核DNA的酶切片段雜交,獲得了<img alt="DNA指紋圖譜分析[DNA Fingerprinting ]" dna指紋圖譜分析[dna="" fingerprinting="" ]"="" height="269" data-cke-saved-src="http://img100.bio1000.com/2012/0508/095250/546.gif" src="http://img100.bio1000.com/2012/0508/095250/546.gif" width="398" align="left" border="0" style="vertical-align: middle; border: 0px;">由多個(gè)位點(diǎn)上的等位基因組成的長(zhǎng)度不等的雜交帶圖紋,這種圖紋極少有兩個(gè)人*相同,故稱(chēng)為"DNA指紋",意思是它同人的指紋一樣是每個(gè)人所*的。DNA指紋的圖像在X光膠片中呈一系列條紋,很像商品上的條形碼。DNA指紋圖譜,開(kāi)創(chuàng)了檢測(cè)DNA多態(tài)性(生物的不同個(gè)體或不同種群在DNA結(jié)構(gòu)上存在著差異)的多種多樣的手段,如RFLP(限制性?xún)?nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性)分析、串聯(lián)重復(fù)序列分析、RAPD(隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA)分析等等。各種分析方法均以DNA的多態(tài)性為基礎(chǔ),產(chǎn)生具有高度個(gè)體特異性的DNA指紋圖譜,由于DNA指紋圖譜具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性,且仍按簡(jiǎn)單的孟德?tīng)柗绞竭z傳,成為目前吸引力的遺傳標(biāo)記。
DNA指紋具有下述特點(diǎn):1.高度的特異性:研究表明,兩個(gè)隨機(jī)個(gè)體具有相同DNA圖形的概率僅3×10-11;如果同時(shí)用兩種探針進(jìn)行比較,兩個(gè)個(gè)體*相同的概率小于5×10-19。*人口約50億,即5×109。因此,除非是同卵雙生子女,否則幾乎不可能有兩個(gè)人的DNA指紋的圖形*相同。2.穩(wěn)定的遺傳性:DNA是人的遺傳物質(zhì),其特征是由父母遺傳的。分析發(fā)現(xiàn),DNA指紋圖譜中幾乎每一條帶紋都能在其雙親之一的圖譜中找到,這種帶紋符合經(jīng)典的孟德?tīng)栠z傳規(guī)律,即雙方的特征平均傳遞50%給子代。3.體細(xì)胞穩(wěn)定性:即同一個(gè)人的不同組織如血液、肌肉、毛發(fā)、等產(chǎn)生的DNA指紋圖形*一致。