選擇BLOCK-iT™ Dicer RNAi試劑盒,利用RNA干擾技術(RNA interference,RNAi)進行簡單、快速的基因阻斷,您不必再花費時間設計siRNA oligo序列及檢測它們的效率,就可直接獲得RANi結果。
功能基因阻斷研究的簡單、快速的方法
RNA干擾(RNAi)正在成為一種的技術之一,用于在功能分析試驗中有效地阻斷特異基因的表達。通過這種方法,利用長度為21-23個核苷酸的小干擾RNA(sirna)可以很容易地、特異地降解互補靶mRNA。
當前常用的用來在哺乳動物細胞中啟動RNAi反應的方法包括以下幾種:轉染合成的siRNA寡核苷酸(siRNAoligonucleocides),體外轉錄后通過Dicer酶將長的雙鏈RNA(dsRNA)切割成Diced siRNA (d-siRNA),或者導入能夠表達siRNA的載體。在這些方法中,只有體外轉錄和切割(Dicing)能夠形成d-siRNA 雙鏈體的復雜池,繼而經(jīng)過轉染進入細胞。這一過程可以很快產(chǎn)生結果,而無需再花費時間設計和檢測多個序列,并確定哪一個將會導致顯著的基因表達阻斷。現(xiàn)在您可以通過BLOCK-iT™ Dicer RNAi 轉染和BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®轉錄試劑盒簡便、快速的獲得所需要的RNAi的原始數(shù)據(jù),方便地研究和選擇模式系統(tǒng)中的目的基因。
BLOCK-iT™ Dicer試劑盒作用原理
BLOCK-iT™ Dicer反應的*步是構建dsRNA模板。您可以通過BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®轉錄試劑盒(包括在BLOCK-iT™ complete Dicer RNAi試劑盒中)很容易地得到轉錄本,而且轉錄本產(chǎn)量大,純度高,能夠直接用來作為BLOCK-iT™ Dicer反應的底物,用高活性的Dicer酶消化后,使用試劑盒中提供的柱子快速純化zui終的d-siRNA,就可獲得高純度的d-siRNA庫,并可以使用有口皆碑的Lipofectamine™ 2000轉染試劑將它導入細胞。
