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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
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簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性

時(shí)間:2016-3-7閱讀:1000
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簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性(simple sequence length polymorphism,SSLP)是據(jù)串聯(lián)重復(fù)排列微衛(wèi)星基序兩側(cè)的單一序列設(shè)計(jì)引物,對(duì)微衛(wèi)星序列(microsalite DNA或simple sequence repeats,SSR)進(jìn)行擴(kuò)增,由微衛(wèi)星基序重復(fù)數(shù)目的變異而產(chǎn)生多態(tài)性。由于基因組中某一特定的微衛(wèi)星的側(cè)翼序列通常都是保守性較強(qiáng)的單一序列,因而可以將微衛(wèi)星側(cè)翼的dna片段克隆、測(cè)序,然后根據(jù)微衛(wèi)星的側(cè)翼序列就可以人工合成引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增,從而將單個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)擴(kuò)增出來。

由于單個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)重復(fù)單元在數(shù)量上的變異,個(gè)體的擴(kuò)增產(chǎn)物在長(zhǎng)度上的變化就產(chǎn)生長(zhǎng)度的多態(tài)性,這一多態(tài)性稱為SSLP,每一擴(kuò)增位點(diǎn)就代表了這一位點(diǎn)的一對(duì)等位基因。SSLP是一些長(zhǎng)度不等的重復(fù)序列、有多個(gè)等位基因位點(diǎn),它們多為2-4個(gè)核苷酸序列重復(fù)(也叫微衛(wèi)星標(biāo)記),在不同動(dòng)植物品系中其重復(fù)次數(shù)不同,故可用PCR法來檢測(cè)各該多態(tài)性序列的長(zhǎng)度,從而快速測(cè)定出多種回交后代中標(biāo)記物的分離方式。

由于微衛(wèi)星標(biāo)記在基因組中廣泛分布,等位性變異豐富,檢測(cè)手段簡(jiǎn)便,穩(wěn)定可靠而受重視,但是微衛(wèi)星標(biāo)記要求已知微衛(wèi)星兩側(cè)單一序列信息而使其發(fā)展受到限制,同時(shí)微衛(wèi)星標(biāo)記具有嚴(yán)格的種屬特異性也使其應(yīng)用上受到限制。

間簡(jiǎn)單序列重復(fù)(inter-simple sequence repeats,ISSR)是近年發(fā)展起來的一類新型分子標(biāo)記技術(shù),它是根據(jù)基因組內(nèi)廣泛存在的微衛(wèi)星基序設(shè)計(jì)單一引物,對(duì)基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增的指紋圖可以同時(shí)提供基因組內(nèi)多個(gè)位點(diǎn)的序列信息。ISSR標(biāo)記是根據(jù)微衛(wèi)星基序設(shè)計(jì)單一通用引物對(duì)基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增而獲得擴(kuò)增指紋圖,它在保留了SSLP標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)的同時(shí),有效地克服了SSLP標(biāo)記中的設(shè)計(jì)困難的缺點(diǎn),可望更好地用于作物分類進(jìn)化,基因定位和基因的分子標(biāo)記輔助選擇研究。

Akagi等用UBC-835對(duì)水稻包臺(tái)型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系MTC-10A和其近等基因系MTC-10R進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)發(fā)現(xiàn)指紋圖具多態(tài)性,連鎖分析表明多態(tài)性片段與包臺(tái)型細(xì)胞質(zhì)雄性不育恢復(fù)基因Rf-1的遺傳距離為3.7±1.1 cM,且定位于第10號(hào)染色體的長(zhǎng)臂上。本研究指在用UBC-835對(duì)野敗型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系珍汕97A和其強(qiáng)恢復(fù)系IR24進(jìn)行擴(kuò)增,并進(jìn)行SSLP和ISSP的標(biāo)記分析。

ISSR標(biāo)記是據(jù)基因組中廣泛存在的微衛(wèi)星序列設(shè)計(jì)通用引物對(duì)基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,引物可以是微衛(wèi)星基序本身或微衛(wèi)星基序重復(fù)引物3′或5′加上2-4個(gè)錨定堿基。ISSR標(biāo)記和SSLP標(biāo)記都是檢測(cè)基因組中微衛(wèi)星序列變異,由于微衛(wèi)星序列不具有結(jié)構(gòu)基因的功能,而且重復(fù)單元的重復(fù)次數(shù)的改變對(duì)整個(gè)生物體而言是微小的變異,所以在生物進(jìn)化過程中積累了豐富的微衛(wèi)星變異,這就決定ISSR標(biāo)記和SSLP標(biāo)記的較高多態(tài)性水平。ISSR標(biāo)記在具備較高多態(tài)性水平的情況下克服了SSLP標(biāo)記設(shè)計(jì)較困難的缺點(diǎn),可望更好地用于基因定位研究。ISSR比AFLP具有更高的多態(tài)性比率。SSLP標(biāo)記比RAPD標(biāo)記更能提示遺傳材料間多樣性。

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