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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒動(dòng)物肝臟中DNA的制備

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一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br />學(xué)習(xí)并掌握動(dòng)物組織總dna的提取方法及其原理。

二、實(shí)驗(yàn)原理:
要獲得純的DNA樣品,必須考慮以下幾點(diǎn):
??如何選材,如何破碎組織細(xì)胞?
??如何除去蛋白質(zhì)?在真核細(xì)胞內(nèi),DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白的形式存在。因此,分離DNA時(shí)必須使其與蛋白質(zhì)解離,并除去蛋白質(zhì)。
??設(shè)法除去RNA的污染;
??防止dna酶的降解作用;

(一)選材
要提取動(dòng)物組織DNA,一般選擇細(xì)胞膜較脆弱,容易破碎的動(dòng)物臟器,如胸腺、肝臟、脾臟、胰臟、精子等。

(二)細(xì)胞破碎方法—機(jī)械物理法:
•研磨:將剪碎的動(dòng)物組織置于研缽或勻漿器中,加入少量石英砂研磨或勻漿,破碎細(xì)胞。這種方法溫和,適合實(shí)驗(yàn)室使用。
•組織搗碎器:較劇烈的破碎細(xì)胞的方法,為了防止發(fā)熱和升溫過高,通常是轉(zhuǎn)10秒—20秒,停10秒—20秒,可反復(fù)多次。
•壓榨法:在1000×105Pa—2000×105Pa 的高壓下使幾十毫升的細(xì)胞懸液通過一個(gè)小孔突然釋放至常壓,細(xì)胞將*破碎。溫和的、*破碎細(xì)胞的方法,但儀器費(fèi)用較高。(少量細(xì)少量細(xì)胞可用French press,大量可用Manto-gaulin
•反復(fù)凍融法:將待破碎的細(xì)胞冷至-15℃到-20℃,然后放于室溫(或40℃)迅速融化,由于細(xì)胞內(nèi)形成冰粒使剩余胞液的鹽濃度增高而引起細(xì)胞溶脹破碎。
•超聲波處理法:借助超聲波的振動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器。使用時(shí)注意降溫,防止過熱。
•冷熱交替法:在90℃左右維持?jǐn)?shù)分鐘,立即放入冰浴中使之冷卻,如此反復(fù)多次,絕大部分細(xì)胞可以被破碎。
組織搗碎勻漿機(jī)

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