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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

士鋒生物染色體GTG標(biāo)本制備

時(shí)間:2014/8/27閱讀:709
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一、原理
非顯帶染色體除可根據(jù)形態(tài)分辨部分染色體,其他多數(shù)染色體難以確認(rèn),而顯帶技術(shù)則可使染色體縱向長(zhǎng)度上出現(xiàn)不同帶紋,以辨認(rèn)全部染色體。GTG即G帶,Trypsin(),Giemsa的簡(jiǎn)寫。Giemsa染料是噻嗪--曙紅染料,染色體的著色有賴于在原位形成噻嗪--曙紅(2∶1)的沉淀物。著色首先取決于二個(gè)噻嗪分子同DNA結(jié)合,在此基礎(chǔ)上再結(jié)合一個(gè)曙紅分子,其次取決于一個(gè)疏水環(huán)境,以利于染料沉淀而著色。通過(guò)的顯帶預(yù)處理可除去陰性G帶區(qū)的疏水蛋白,或使它們的結(jié)構(gòu)變成更疏水狀態(tài)。由此可知,在G顯帶中抽取的蛋白往往是疏水的,且主要來(lái)自陰性G帶區(qū)。
二、用品和試劑
0.25%(0.85%NaCl配制,pH為7.2—7.4),余同實(shí)驗(yàn)一。
三、操作步驟
1.標(biāo)本老化:
按常規(guī)制備人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本(未染色)氣干后,經(jīng)78℃烘箱2—3小時(shí)。 取出置37℃恒溫箱3天后預(yù)處理。
2.預(yù)處理:
將染色體標(biāo)本浸入溶液(已置4℃冰箱穩(wěn)1小時(shí)以上)中40—50秒,取出立即水洗去多余。
3.Giemsa染色:
1∶10 Giemsa染色液染色5—10分鐘,洗去多余染料,氣干。
4.鏡檢:油鏡下可見(jiàn)分散良好的染色體縱軸上呈現(xiàn)深淺不同帶紋,即為可讀標(biāo)本。
四、注意事項(xiàng)
1.常規(guī)制備的染色體標(biāo)本,要有較多分裂相,分散良好,染色體長(zhǎng)度適中。
2.GTG帶的關(guān)鍵在于處理的時(shí)間。若染色體仍著色較深,帶紋不明,則預(yù)處理時(shí)間不足,應(yīng)延長(zhǎng)預(yù)處理時(shí)間;若染色體變粗并顯出毛糙邊緣,甚至呈糊狀,則為預(yù)處理過(guò)度,應(yīng)適當(dāng)縮短處理時(shí)間。
3.Giemsa染色時(shí)間要適中,時(shí)間短,著色不夠,深淺帶反差??;時(shí)間過(guò)長(zhǎng),著色深,亦影響帶紋反差,不易識(shí)別。

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