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細胞毒T淋巴細胞(CTL)活性測定方法進展

時間:2013/12/23閱讀:1304
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細胞介導的免疫反應(Cell mediated immune, CMI)在機體抗感染及抗腫瘤免疫、移植排斥反應和自身免疫病中發(fā)揮重要的作用。CMI的主要效應細胞之一為細胞毒T淋細胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。目前在醫(yī)學基礎與臨床研究中重視CTL活性測定,將其作為了解機體細胞免疫功能和探索疾病機理的重要方法之一。
經(jīng)文學事業(yè)上的資助者的CTL活性測定方法為51鉻(Cr)釋放法,本法結(jié)果準確、重復性好,但也存在以下不足:①使用放射性的51Cr不利于安全操作及廢物處置,且需特殊測定儀器;②51Cr自發(fā)釋放率高,常因不同靶細胞標記效率變化差別大而影響結(jié)果判定;③51Cr半衰期(27.8天),無法用于需多次測定的動物試驗;④細胞共育時間短而試驗操作步驟多,不能在單個細胞水平進行測定。因此多年來人們一直試圖尋找可以替代51Cr釋放法的CTL活性測定方法,如采用熒光標記、流式細胞分析和報告基因等技術的靈敏可靠、簡單易行的非同位素測定法。
1 熒光測定法
1.1 測定法
1.1.1 alamarBlue一步熒光測定法

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