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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
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植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)介紹

時(shí)間:2013/11/3閱讀:856
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(廣義)又叫離體培養(yǎng),指從植物體分離出符合需要的組織.器官或細(xì)胞,原生質(zhì)體等,通過(guò)無(wú)菌操作,在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

(狹義)組培指用植物各部分組織,如形成層.薄壁組織.葉肉組織.胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株,也指在培養(yǎng)過(guò)程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng),愈傷組織再經(jīng)過(guò)再分化形成再生植物。

植物組織培養(yǎng)基礎(chǔ)理論

1、植物細(xì)胞性
植物細(xì)胞性(totipotency)是組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。一個(gè)生活的植物細(xì)胞,只要有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核,它就會(huì)有一整套發(fā)育成一個(gè)完整植株的遺傳基礎(chǔ),在一個(gè)適當(dāng)?shù)臈l件下可以通過(guò)分裂、分化再生成一個(gè)完整植株,這就是所謂的細(xì)胞性。但是在自然狀態(tài)下,由于細(xì)胞在植物體內(nèi)所處位置及生理?xiàng)l件的不同,它的分化受到各方面的調(diào)控,致使其所具有的遺傳信息不能全部表達(dá)出來(lái),所以只能形成某種特化細(xì)胞,構(gòu)成植物體的一種組織或一個(gè)器官的一部分。由此可以說(shuō)明條件是十分重要的,或者說(shuō)是關(guān)鍵的,只要條件合適,細(xì)胞潛在的遺傳能力就會(huì)表現(xiàn)出來(lái)。植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)就是以細(xì)胞性作為理論依據(jù),用人為的方法創(chuàng)造出一個(gè)適合于生長(zhǎng)的理想條件,使細(xì)胞的性得以發(fā)揮。
從理論上講,只要是一個(gè)生活的細(xì)胞,都有再生出一個(gè)完整植株的潛力,但實(shí)際情況并非如此簡(jiǎn)單。就目前所知,細(xì)胞的再生潛力與其分化程度呈負(fù)相關(guān),就是說(shuō)細(xì)胞分化程度越高其再生能力越低,但也有人認(rèn)為細(xì)胞的再生能力與其分化程度無(wú)關(guān),只是人們現(xiàn)在還沒(méi)能*掌握細(xì)胞分化的機(jī)制。雖然還沒(méi)有*從理論上揭示其原因,但事實(shí)是越老的細(xì)胞,其基因的表達(dá)就越受到嚴(yán)格的制約,或者說(shuō)喪失功能或不表現(xiàn)功能的基因越多,所以應(yīng)盡量選取幼嫩的植物組織作為培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)材料。同時(shí),還應(yīng)該考慮到,一定的基因型或外植體的再生能力并不是一成不變的,在不同培養(yǎng)條件下,同一基因型或外植體的表現(xiàn)不同,高度分化的細(xì)胞或組織只要條件合適,也有產(chǎn)生再生植株的可能,這種可能性能否變成現(xiàn)實(shí),還有待于人們繼續(xù)努力。

2、細(xì)胞分化、脫分化與再分化
(cell differentiation,didifferentiation and ridifferentiation)
一粒成熟的種子含有一個(gè)小小的胚,也可以叫做胚胎。構(gòu)成胚胎的所有細(xì)胞幾乎都保持著未分化的狀態(tài)和旺盛的細(xì)胞分裂能力,其細(xì)胞質(zhì)濃稠,細(xì)胞核較大,細(xì)胞與細(xì)胞之間沒(méi)有很大差異,這些細(xì)胞都可以叫做胚性細(xì)胞,或叫分生性細(xì)胞或未分化細(xì)胞。在適宜的條件下,隨著種子的萌發(fā),構(gòu)成胚胎的所有細(xì)胞即開始分裂活動(dòng),增加細(xì)胞數(shù)目。隨著時(shí)間的進(jìn)行細(xì)胞的命運(yùn)發(fā)生不同變化,形態(tài)和功能也發(fā)生變化,有的形成了葉子的細(xì)胞,有的形成了根的細(xì)胞,有的形成莖的細(xì)胞,有的仍保持分裂能力,有的則逐漸失去分裂能力,細(xì)胞的這種在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生*性(不可逆轉(zhuǎn)性)適度變化的過(guò)程叫做分化。分化主要是由細(xì)胞內(nèi)的基因決定的,也就是說(shuō)分化是基因在時(shí)間和空間兩個(gè)方面差次表達(dá)的結(jié)果。分化的結(jié)果導(dǎo)致細(xì)胞分裂能力的喪失,伴隨的是細(xì)胞的分化、成熟與組織的形成,是植物根、莖、葉、花、果實(shí)和種子的形成,是一個(gè)成熟植物體的出現(xiàn)。在正常的自然狀態(tài)下,這些已經(jīng)分化的細(xì)胞不會(huì)再恢復(fù)分裂能力重新開始細(xì)胞分裂,直到植物體死亡為止。
當(dāng)把一個(gè)已經(jīng)失去了分裂能力,處于分化成熟和分裂靜止?fàn)顟B(tài)的細(xì)胞置于特定的增殖培養(yǎng)基上時(shí),它首先發(fā)生的變化是回復(fù)到分生性狀態(tài),這一狀態(tài)包括由溶酶體的活動(dòng)而將失去功能的細(xì)胞質(zhì)組分降解,并產(chǎn)生新的細(xì)胞質(zhì)組分(即細(xì)胞器的破壞與重建),同時(shí)細(xì)胞內(nèi)酶的種類與活性發(fā)生改變,蛋白質(zhì)合成和細(xì)胞代謝過(guò)程也發(fā)生改變,zui后引起基因表達(dá)的改變,細(xì)胞的性質(zhì)和狀態(tài)發(fā)生了扭轉(zhuǎn),可以說(shuō)是返老還童。由失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂,形成無(wú)分化的細(xì)胞團(tuán)即愈傷組織的現(xiàn)象(或者說(shuō)是過(guò)程)稱為“脫分化”(dedifferentiation)。經(jīng)過(guò)脫分化的細(xì)胞如果條件合適,就可以保持旺盛的分裂狀態(tài)而不發(fā)生分化。由無(wú)分化的愈傷組織的細(xì)胞再轉(zhuǎn)變成為具有一定結(jié)構(gòu),執(zhí)行一定生理功能的細(xì)胞團(tuán)和組織,構(gòu)成一個(gè)完整的植物體或植物器官的現(xiàn)象(或過(guò)程),叫做“再分化”(redifferentiation)。一個(gè)已分化細(xì)胞要表達(dá)出其性,就要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化的過(guò)程,這就是植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)所要達(dá)到的目的。設(shè)計(jì)培養(yǎng)基和創(chuàng)造合適培養(yǎng)條件的主要原則就是如何促使植物組織和細(xì)胞完成脫分化和再分化,培養(yǎng)的主要工作就是設(shè)計(jì)和篩選培養(yǎng)基,探討和建立合適的培養(yǎng)條件。
植物激素在調(diào)節(jié)細(xì)胞脫分化和再分化中起到主要作用。植物對(duì)激素的反應(yīng)十分敏感,培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類的種類、相對(duì)比例和量都能直接影響到細(xì)胞脫分化和再分化的過(guò)程,組培中常常是通過(guò)調(diào)節(jié)激素的種類、濃度和相對(duì)比例來(lái)達(dá)到調(diào)節(jié)脫分化和再分化的目的。

3、器官發(fā)生和胚狀體發(fā)生(organogenesis and embryogensis)
培養(yǎng)的植物組織與細(xì)胞再經(jīng)過(guò)脫分化和再分化再生出新的植物體過(guò)程中,特別是再分化時(shí),可經(jīng)過(guò)兩條途徑,一是由愈傷組織的部分細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽(或根),再在另一種培養(yǎng)基上產(chǎn)生根(或芽),形成一個(gè)完整的植株,因?yàn)檠亢透际侵参矬w的器官,所以這一過(guò)程叫器官發(fā)生途徑。另一個(gè)是在愈傷組織中產(chǎn)生出一些與種子中的胚相似的結(jié)構(gòu),即同時(shí)形成一個(gè)有苗端和根端的兩極性結(jié)構(gòu),然后再在另一種培養(yǎng)基上同時(shí)發(fā)展成帶根苗,由于這一過(guò)程與種子中胚的形成和種子萌發(fā)時(shí)形成幼苗的過(guò)程相似,所以叫做胚狀體發(fā)生或無(wú)性胚胎發(fā)生。組培條件下,植物再生是走器官發(fā)生途徑還是走胚狀體途徑,隨植物不同而不同,也隨培養(yǎng)基的不同而變化,有時(shí)甚至同一種植物在同一條件下,即存在體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑,也存在器官發(fā)生發(fā)生途徑,這都是自然現(xiàn)象,是正常的,只是兩種發(fā)育途徑的頻率隨著基因型不同和培養(yǎng)條件的改變而差異顯著。
 

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