脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑（Life：11668-019）
關(guān)鍵詞：Life脂質(zhì)體2000價(jià)格lipo2000說(shuō)明書(shū)；由上海慧穎生物供應(yīng)Invitrogen產(chǎn)品，*原裝*，*！
TRlzol ®Reagent：現(xiàn)貨庫(kù)存
TRIZOL LS Reagent：現(xiàn)貨熱賣
Lipofectamine RNAiMax：*
B-27（黃顏色）不含*：大量庫(kù)存
公司所提供的Invitrogen轉(zhuǎn)染試劑以及抽提試劑，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
操作注意事項(xiàng)：
1、轉(zhuǎn)染前一天，*消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)，細(xì)胞鋪板，使其在轉(zhuǎn)染日密度為90%。細(xì)胞鋪板在0.5ml含血清，不含抗生素的正常生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中。
2、對(duì)于每孔細(xì)胞，使用50μl無(wú)血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋0.8μg-1.0μg DNA。3、對(duì)于每孔細(xì)胞，使用50μl OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基稀釋1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000試劑。Lipofectamine 2000稀釋后保溫5分鐘（在30分鐘內(nèi)同稀釋的DNA混合。保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)降低活性。） 注意：即使Lipofectamine 2000使用OPTI-MEMⅠ稀釋，細(xì)胞也可以使用D-MEM培養(yǎng)。如果D-MEM做為L(zhǎng)ipofectamine 2000的稀釋液，必須在5分鐘內(nèi)同稀釋的DNA混合。
4、混合稀釋的DNA（第2步）和稀釋的Lipofectamine 2000（第3步）。在室溫保溫20分鐘。 注意：溶液可能會(huì)混濁，但不會(huì)影響轉(zhuǎn)染。復(fù)合物可以在室溫保持6小時(shí)穩(wěn)定。
5、直接將復(fù)合物加入到每孔中，搖動(dòng)培養(yǎng)板，輕輕混勻。注意：如果在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染，使用含血清的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞鋪板。在加入復(fù)合物前移去生長(zhǎng)培養(yǎng)基，替換為0.5ml無(wú)血清培養(yǎng)基。
6、在37℃，5％的CO2中保溫24-48小時(shí)，無(wú)須去掉復(fù)合物或更換培養(yǎng)基或者在4-5小時(shí)后更換生長(zhǎng)培養(yǎng)基也不會(huì)降低轉(zhuǎn)染活性。
7、在細(xì)胞中加入復(fù)合物24-72小時(shí)后，分析細(xì)胞抽提物或進(jìn)行原位細(xì)胞染色，檢測(cè)報(bào)告基因活性。這依賴于細(xì)胞類型和啟動(dòng)子活性。對(duì)穩(wěn)定表達(dá)，在開(kāi)始轉(zhuǎn)染一天后將細(xì)胞傳代至新鮮培養(yǎng)基中，兩天后加入篩選抗生素。進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)需要數(shù)天或數(shù)周。
8、對(duì)于96孔板培養(yǎng)，不再需要提前一天進(jìn)行細(xì)胞鋪板，而可以直接在平板中制備復(fù)合物，然后將細(xì)胞懸浮液加入到復(fù)合物就可以了，這樣進(jìn)一步減少了轉(zhuǎn)染時(shí)間。這種改進(jìn)步驟已經(jīng)過(guò)293-H，293-F，COS-7L和CHO細(xì)胞的試驗(yàn)，同傳統(tǒng)方法相比活性稍低?？旖莸牟襟E和蛋白表達(dá)細(xì)胞系的高效轉(zhuǎn)染使得Lipofectamine 2000非常適用于96孔板的高通量轉(zhuǎn)染，比如cDNA文庫(kù)的篩選和蛋白瞬時(shí)表達(dá)。
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑（Life：11668-019）
Gibco胎牛血清，西班牙瓊脂糖，Transgenomic突變檢測(cè)試劑盒 大量庫(kù)存
ATCC細(xì)胞，癌細(xì)胞，脂質(zhì)體2000 *
產(chǎn)品名稱：脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑
英文名稱：Lipofectamine TM 2000 Reagent
別名：Lipo2000，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，Lipofectamine 2000，lp2000脂質(zhì)體
品牌：Life
貨號(hào)及規(guī)格： 11668-019
規(guī)格：1.5ML
儲(chǔ)存溫度：4°C
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
特惠價(jià)格：電議
慧穎提醒您要注意避免多次反復(fù)長(zhǎng)時(shí)間開(kāi)蓋，因?yàn)榭赡軙?huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。當(dāng)然還有要注意質(zhì)粒的質(zhì)量，質(zhì)粒的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵。
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