RNeasy Mini實(shí)驗(yàn)方案。

使用RNeasy Mini Kit純化的總RNA具有高質(zhì)量，適用于多種下游操作。實(shí)驗(yàn)方案還包括部分純化的RNA、體外轉(zhuǎn)錄本和酶反應(yīng)RNA的回收。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠（酵母樣本需要）。因樣本來源的發(fā)育階段、種屬和生長(zhǎng)條件的不同，從樣本中分離的RNA量也各異。由于RNA酶步驟富集的RNA種屬>200 nt，因此RNA產(chǎn)量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。

從多種樣本中純化高品質(zhì)RNA。

使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的甲醛瓊脂糖凝膠電泳和northern印跡。從各種來源的樣本中分離總RNA（10 µg）上樣至各泳道。所有組織均來源于小鼠。酵母：Saccharomyces cerevisiae；E. coli菌株：HB101。32P標(biāo)記的探針識(shí)別的（G）GAPDH；（E）翻譯延長(zhǎng)因子EF-1α；和（O）外膜蛋白A序列。（E和O分別由瑞士巴塞爾大學(xué)的P. Philippsen和德國(guó)蒂賓根馬克斯-普朗克生物學(xué)研究所的U. Henning提供。）B. subtilis未采用探針檢測(cè)。M：0.24–9.5 kb RNA分子量標(biāo)準(zhǔn)。胚胎、Huh7和HeLa細(xì)胞泳道中的7.5 kb條帶（圖示）為核前體RNA。

對(duì)少至100個(gè)細(xì)胞的RNA進(jìn)行RT-PCR。

使用RNeasy Mini Kit從圖示數(shù)目的HeLa細(xì)胞中分離的總RNA的RT-PCR。使用不含RNA酶的DNA酶酶切10 µl（1/5）洗脫液，并使用oligo-dT引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。使用2.5 µl（1/20）的cDNA混合物進(jìn)行50 µl PCR。擴(kuò)增452 bp的GAPDH片段。C-：陰性對(duì)照；C+：陽性對(duì)照；M：100 bp分子量標(biāo)準(zhǔn)。

RNeasy Mini離心柱。

RNeasy Mini Kit中提供RNeasy Mini離心柱。