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takara熒光實(shí)時(shí)定量qPCR試劑RT Master Mix反轉(zhuǎn)錄

5×PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)^*1	400 μl
RNase Free dH2O	1 ml ×2
EASY Dilution (for Real Time PCR)^*2	1 ml

1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應(yīng)Buffer (含有Mg²⁺) 。 2 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)梯度稀釋cDNA或RNA標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于受Microtube吸附作用等的影響，往往不能準(zhǔn)確地進(jìn)行稀釋，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果精度降低。使用本制品時(shí)，即使稀釋至低濃度也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確地稀釋，容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以單獨(dú)購(gòu)買 (Code No.: 9160/9160Q)。注意：EASY Dilution請(qǐng)與本公司Real Time PCR試劑組合使用，對(duì)于其他公司的同類制品的適用性本公司尚未進(jìn)行確認(rèn)。

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試劑盒特長(zhǎng)

1. 制品為預(yù)先混好的Premix形式，只需加入模板RNA和水便可以開始反應(yīng)。
2. 可以在較短時(shí)間內(nèi)高效合成Real Time PCR用cDNA，是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉(zhuǎn)錄引物，可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí)，由于模板濃度低不穩(wěn)定，因而會(huì)縮小曲線范圍，結(jié)果精度降低。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR)，將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋，容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

■ 注意事項(xiàng)

1. 5×PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部。由于5×PrimeScript RT Master Mix粘度高，用移液槍慢慢反復(fù)吸打充分混勻后使用。
2. 分裝試劑時(shí)務(wù)必使用新的槍頭 (Tip)，以防止樣品間污染。
3. 本制品中已經(jīng)加入了反轉(zhuǎn)錄Primer（Oligo dT Primer 和Random 6 mers），如果要使用Gene Specific Primer進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，則不能使用本制品。