德國(guó)凱杰qiagen miScript II RT Kit貨號(hào)218160 218161

miScript II RT Kit是miScript PCR System的重要組成部分，用于miRNA定量檢測(cè)。配合miScript SYBR Green PCR Kit和miScript PCRarrays（miRNome或Pathway-Focused miScript miRNA PCR Arrays）或所需的檢測(cè)（用于miRNA或其他非編碼RNA的miScript Primer Assays、用于miRNA前體的miScript Precursor Assays或用于mRNA的QuantiTect Primer Assays），miScript II RT Kit合成的cDNA可作為real-time PCR 的模板。

德國(guó)凱杰qiagen miScript II RT Kit貨號(hào)218160 218161

在miScript HiSpec Buffer中將成熟miRNA選擇性轉(zhuǎn)化為cDNA。

在使用miScript HiSpec Buffer進(jìn)行的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中，采用poly（A）聚合酶多腺苷酰化成熟miRNA，并利用逆轉(zhuǎn)錄酶及oligo-dT引物擴(kuò)增將其轉(zhuǎn)變?yōu)閏DNA。cDNA隨后被用于成熟miRNA表達(dá)的real-time PCR定量。

在miScript HiFlex Buffer中將各種不同RNA同時(shí)轉(zhuǎn)化為cDNA。

在使用miScript HiFlex Buffer進(jìn)行的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中，采用poly（A）聚合酶多腺苷?；痬iRNA及其他非編碼RNA（ncRNA），并利用逆轉(zhuǎn)錄酶及oligo-dT引物擴(kuò)增將其轉(zhuǎn)變?yōu)閏DNA。利用oligo-dT和隨機(jī)引物擴(kuò)增，使用逆轉(zhuǎn)錄酶將mRNA轉(zhuǎn)變?yōu)閏DNA。使用適當(dāng)?shù)姆治鲞M(jìn)行成熟miRNA、前體miRNA、其他ncRNA和mRNA檢測(cè)。

結(jié)果具有可重復(fù)性。

使用miRNeasy Mini Kit從 [A] 2份相同的HeLa S3細(xì)胞沉淀（傳代次數(shù)相同）和 [B] 2份于不同時(shí)間取自不同親本的HeLa S3細(xì)胞沉淀中純化總RNA。使用miScript PCR System制備cDNA，在real-time PCR中用作模板，進(jìn)行miFinder miScript miRNA PCR Array分析。重復(fù)樣本的C_T值曲線說(shuō)明其結(jié)果的可重復(fù)性高。上述實(shí)驗(yàn)是由*使用miScript PCR System的用戶完成的。

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