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Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

產(chǎn)品描述:

SMM 293-TI培養(yǎng)基適用于貼壁、懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關的細胞（如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT）的長期生長和瞬時轉(zhuǎn)染。

SMM 293-TI含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份，無需添加任何添加物即可使用。其化學成分明確，主要包含細胞生長所需的無機鹽， HEPES，碳酸氫鈉，必需和非必需氨基酸，維生素，酚紅，微量元素， PluronicÒ F-68和其他無機物（注意：此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清）。

Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

產(chǎn)品特點:

• HEK293細胞瞬時轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基	• 即用型*培養(yǎng)基，不用添加其他組分
• 培養(yǎng)基批次間性能穩(wěn)定，同類產(chǎn)品性能更*	• 無動物源組分，無血清，化學成分明確
• 轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基	• 上千蛋白表達成功案例
• 適用于瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株轉(zhuǎn)染以及培養(yǎng)	• 適用于細胞的懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應器培養(yǎng)

SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

產(chǎn)品參數(shù):

外觀	澄清紅色溶液	適用細胞株	HEK293EBNA及相關的細胞（如HEK293F、HEK293T、HEK293H 、HEK293S、HEK293FT）
滲透壓	275±10 mOsm/kg	細胞接種密度	0.3-0.6×10⁶ cells/mL
pH值	6.0–6.5	倍增時間	< 26 hrs（因細胞類型、狀態(tài)影響而存在數(shù)值變化）
無菌檢測	無菌	細胞培養(yǎng)評價	優(yōu)良
內(nèi)毒素	< 10 EU/mL	產(chǎn)品用途	僅用于科學研究，不推薦用于人類或動物的診斷和治療
有效期	6個月	儲存條件	2-8 ℃，避光

SMM 293-TI培養(yǎng)基為澄清紅色透明液體，2~8℃避光保存，如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀，請勿使用。

產(chǎn)品使用效果:

細胞密度高

SMM 293-TI培養(yǎng)基在HEK293T 的培養(yǎng)上更具優(yōu)勢。下圖從細胞生長曲線以及細胞活率兩個方面，展示了四種培養(yǎng)基對HEK293T細胞的培養(yǎng)效果，SMM 293-TI培養(yǎng)基明顯具有不亞于國外的質(zhì)量。

成功表達多種重組蛋白質(zhì)

SMM 293-TI 成功應用于多種重組蛋白質(zhì)的表達生產(chǎn)，獲得上千個高品質(zhì)的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。其中一種Fc標簽融合蛋白的產(chǎn)量高達2.5g/L。

產(chǎn)品使用方法:

細胞復蘇：
迅速取出凍存的細胞，在37 ℃水浴條件下進行解凍（可以在水中輕輕晃動，時間控制在30s以內(nèi)）；輕輕地混勻細胞并將融化的細胞全部移至50 mL無菌離心管中，逐滴加入10 mL預熱到37℃的培養(yǎng)基，離心換液（100 g，3 min）去除全部上清，加入293新鮮培養(yǎng)基重懸，使得細胞密度達到0.4~0.6×10⁶cells/mL；將細胞置于37℃，5%CO₂，轉(zhuǎn)速為110~175rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)； 2-5天后通過人工或儀器測定細胞的密度以及活率，如果細胞密度達到1.0×10⁶cells/mL，活率85%以上則可進行傳代培養(yǎng)；如果細胞密度低于1.0×10⁶cells/mL，則建議對細胞進行離心（100g，5min），然后重懸于20-30mL 的新鮮培養(yǎng)基中使得細胞密度為0.6×10⁶cells/mL 左右，并繼續(xù)培養(yǎng)至細胞正常生長則可進行傳代培養(yǎng)。
細胞轉(zhuǎn)染：
在SMM 293-TI培養(yǎng)基中，用Sinofection^®轉(zhuǎn)染試劑（貨號STF01），可以實現(xiàn) HEK293 細胞的高轉(zhuǎn)染效率。具體細節(jié)可以參考Sinofection^® 轉(zhuǎn)染試劑說明書。
細胞馴化：
懸浮的HEK293 cells幾乎不用馴化就可直接適應SMM 293-TI培養(yǎng)基。如果直接更換培養(yǎng)基失敗則推薦下面兩種方式來馴化HEK293細胞使其適應SMM 293-TI培養(yǎng)基：1）直接馴化；2）逐步馴化。
1）直接馴化：
將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里的細胞，直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中，細胞密度控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL；將細胞置于37 ℃，5% CO₂，轉(zhuǎn)速為110~175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)； 4~6天后對細胞培養(yǎng)液進行稀釋（或者離心更換上清），保持稀釋（或者離心）后細胞密度為0.3~0.4×10⁶cells/mL；經(jīng)過在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×10⁶cells/mL，細胞活率大于90%。這說明細胞已經(jīng)*適應了SMM 293-TI培養(yǎng)基，之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×10⁶/ml左右。
注意:如果直接馴化效果欠佳，可采用逐步馴化的方法。
2）逐步馴化：
將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里的細胞，直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中，細胞密度控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL，原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為75:25；將細胞置于37℃，5%CO₂，轉(zhuǎn)速為110-175rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)； 4~6天后進行傳代，如果細胞生長狀態(tài)良好，且活率>90% 則傳代時原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為50:50，細胞密度仍控制在0.3~0.4×10⁶cells/mL。如細胞生長慢，可離心上清，留20%原培養(yǎng)基，加入80% 的新鮮SMM 293-TI培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；重復步驟3逐步增加SMM 293-TI培養(yǎng)基所占的比例（原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到100%的SMM 293-TI培養(yǎng)基；經(jīng)過在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×10⁶cells/mL，細胞活率大于90%。這說明細胞已經(jīng)適應了SMM 293-TI*培養(yǎng)基，之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×10⁶cells/mL。

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