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1. WB
A.樣品準備
注意：細胞培養(yǎng)基產品包括經典和特殊培養(yǎng)基，血清，培養(yǎng)基添加物，誘導物，抗生素。產品列表等信息請登陸查詢。
單層細胞
室溫下，移去培養(yǎng)基并用PBS沖洗直徑
加入0.6ml RIPA裂解液（sc-24948）。
用0.3ml RIPA裂解液洗一次培養(yǎng)皿，將洗液與之前的溶解物合并。（可選擇：加入10μl 10mg/ml PMSF（sc-3597）儲存液和/或用21號注射器針頭切割DNA）冰上孵育30-60min。
將細胞溶解物
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懸浮細胞
室溫低速離心5min，收集約2.0×107個細胞。小心除去培養(yǎng)基。
室溫下用PBS沖洗細胞沉淀，再次低速離心5min，小心除去培養(yǎng)基。
加入1.0ml冰預冷的RIPA裂解液（sc-24948），裂解液中現用現加入蛋白酶抑制劑和/或磷酸酶抑制劑。用移液器輕輕懸浮細胞，冰上孵育30min。
用21號注射器針頭、杜恩斯勻漿器或超聲進一步破壞使細胞均質化。注意不要使裂解物溫度過高。（可選擇：加入10μl 10mg/ml PMSF（sc-3597）儲存液。）冰上孵育30min。
將裂解液轉移至離心管，
組織樣品
稱重組織塊，并用干凈的剃刀剪碎。冰凍組織可被切的很薄，并在含蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑的RIPA裂解液（sc-24948）中解凍。3ml冰預冷的RIPA/g組織。
杜恩斯勻漿器或超聲進一步破壞使細胞均質化，溫度維持在
將裂解液轉移至離心管，
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