熒光素標記促甲狀腺素釋放激素抗體IgG，Anti-TRH/FITC

為了讓實驗更加嚴謹有說服力都要設計對照實驗，對照分為：陽性對照（有標準品（比如β-actin，GAPDH）或陽性血清）；陰性對照（測血時用相應小鼠未免疫血清（即正常血）；空白對照（不加一抗，用PBS代替）；無關對照（用無關抗體）

實驗設計時所釆用的抗原批次要一樣，盡量的避免人為的帶來個體差異。特別在做裂解液時更要注意所釆用的操作條件，盡可能的排除可變因素給實驗帶來不確定性。
凝膠的質(zhì)量直接影響以后的實驗結(jié)果，要特別注意幾點：凝膠要均一沒有氣泡；積層膠與分離膠界面要水平；AP和TEMED的量不能過多，太多會導致膠易脆裂；拔梳子時要快，盡量保證點樣孔平整。

加一抗二抗要嚴格保證反應時間，洗膜要注意盡可能地將一抗二抗洗凈，有利于降低背景；還要注意一抗二抗的匹配。

在顯色發(fā)光時要特別注意二抗所對應的顯色方法，特別是在發(fā)光時要注意發(fā)光時間和顯影時間的控制，以看得清楚目的條帶為標準。

Western bloting是用來對蛋白質(zhì)進行檢測的一種常用方法，通過抗原抗體的免疫反應可以定量測出抗體的相對分子量，以及抗體的相對豐度或與已知抗原的關系等等。目前它應用在多個領域,在臨床上檢測傳染病和自身免疫病、過敏癥等，在抗體生產(chǎn)領域它與ELISA、ICC、IHC、IFA等免疫技術相接合已成為單克隆抗體生產(chǎn)的主要篩選手段。