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人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒

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所在地上海市

更新時(shí)間:2018-05-04 13:08:41瀏覽次數(shù):256次

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檢測(cè)范圍:156.25 -10000 pg/ml

原理類型:雙抗夾心

保存條件:2-8

有效期:六個(gè)月

試劑盒保存:2-8

樣本:血清、血漿、組織、上清、卵母細(xì)胞等相關(guān)體液

人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒間接法的操作步驟:

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至110μgml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。

2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同雙抗體夾心法"4、5、6。

3. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,371030分鐘。4. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

5. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"“-"號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。

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