生物試劑：

*轉(zhuǎn)移酶（GST）是生物體內(nèi)一類重要的解毒酶，主要催化將體內(nèi)疏水毒性分子親核加成到還原性*（GSH）的反應(yīng)，廣泛存在于各類原核和真核生物中。Kappa類GST由于其*的細(xì)胞定位、氨基酸序列和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，被特別單獨(dú)分類，以區(qū)別于被廣泛研究的胞漿/可溶性/經(jīng)典類GST。在以往的研究中，這類GSTk的催化機(jī)制還未得到清楚的闡述。

相關(guān)研究人員解析了不結(jié)合底物與結(jié)合抑制劑S-hexylglutathione（GTX）的兩種不同形式的hGSTk的晶體結(jié)構(gòu)，結(jié)合穩(wěn)態(tài)酶動(dòng)力學(xué)研究，揭示了hGSTk的催化機(jī)制。不同形式的hGSTk結(jié)構(gòu)顯示，在結(jié)合底物前后，hGSTk由“敞開”式構(gòu)象變?yōu)?ldquo;閉合”式構(gòu)象，以形成完整的GSH結(jié)合位點(diǎn)（G位點(diǎn)）和疏水底物結(jié)合位點(diǎn)（H位點(diǎn)）。G位點(diǎn)保守的Ser16殘基作為催化殘基在反應(yīng)中奪取GSH巰基的質(zhì)子，而保守的Asp69、Ser200、Asp201和Arg202與GSH的g-谷氨酰羧基形成相互作用網(wǎng)絡(luò)，穩(wěn)定了GS-的電荷。hGSTk的H位點(diǎn)位于蛋白表面的大型疏水口袋，這個(gè)疏水口袋的構(gòu)象具有高度靈活性，可以適應(yīng)各種不同疏水底物的結(jié)合。

酶動(dòng)力學(xué)研究還表明，hGSTk在催化GSH和底物CDNB的連接反應(yīng)中采取了快速平衡隨機(jī)順序雙-雙模型。研究結(jié)果還提示其它GSTk酶可能采用同樣的催化反應(yīng)機(jī)制。這一研究成果將有助于人們進(jìn)一步理解不同類型的*轉(zhuǎn)移酶之間的進(jìn)化關(guān)系、以及它們?cè)隗w內(nèi)的不同生物學(xué)功能。