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試劑盒分類有哪些

時(shí)間:2012-4-19閱讀:259
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試劑盒有哪些分類
問(wèn)
一般試劑盒不是都分人、小鼠、大鼠的嗎,比如說(shuō)ELISA雙抗夾心試劑盒,如果檢測(cè)人的抗原就要用人的試劑盒,我想問(wèn)的是,這幾種試劑盒本身區(qū)別在哪里,是包被的抗體與酶標(biāo)抗體來(lái)源不同嗎,也就是說(shuō)人的試劑盒就要都用人的抗體?在臨床上,不能用小鼠的單抗包被酶標(biāo)制成的試劑盒嗎?換句話說(shuō),檢測(cè)人的ELISA試劑盒是怎么做出來(lái)的呢?

答:

你可能把抗原抗體弄錯(cuò)了。測(cè)人的試劑盒用的抗體是抗人的,比如測(cè)人乙肝病毒,可以用小鼠抗人乙肝病毒。這樣這個(gè)抗體才能與人乙肝病毒抗原反應(yīng)。
夾心法中,包被的抗體與酶標(biāo)抗體,如果是單抗,理論是不能用一樣的,不過(guò)商品化的單抗有可能是混合單抗(識(shí)別不同的表位的抗體混在一起)這樣就又可以用一樣的。而多抗用一樣的自然沒(méi)問(wèn)題。

一般的人們總以為試劑盒只分為人,小鼠與大鼠,其實(shí)不是的,試劑盒分很多種,有人體,動(dòng)物的,植物,在這里面還要分ELISA試劑盒,比如說(shuō)ELISA試劑盒里面還要分:細(xì)胞的,免疫的,血清的等等。

像常見(jiàn)傳染病檢測(cè)elisa試劑盒有分為:幽門(mén)螺桿菌,乙腦,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原體,性病,腺病毒,微小病毒B19,天皰瘡,水痘-帶狀皰疹病毒,生殖支原體,傷寒,沙眼,腮腺炎,人型支原體,麻疹,輪狀病毒,流行性出血熱,淋球菌,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團(tuán)菌,結(jié)核,膠原,尖銳濕疣,甲肝,脊髓灰質(zhì)炎,急性胰腺炎尿*,霍亂,呼吸道合胞病毒,肝吸蟲(chóng),副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細(xì)胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A族鏈球菌等等
在使用試劑盒是還要注意:ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。

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