蛋白質(zhì)染色

   蛋白質(zhì)染色，染色液種類繁多，各種染色液染色原理不同，靈敏度各異。使用時(shí)可根據(jù)需要加以選擇。常用的染色液有：
    1．氨基黑10B(amino black 10B又稱為amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack，2B 200)氨基黑10B分子式為C22H13N6S3Na3，MW=715，λmax=620-630nm，是酸性染料。其磺酸基與蛋白質(zhì)反應(yīng)構(gòu)成復(fù)合鹽，是zui常用的蛋白質(zhì)染料之一，但對(duì)SDS-蛋白質(zhì)染色效果不好。另外，氨基黑10B染不同蛋白質(zhì)時(shí)，著色度不等、色調(diào)不一(有藍(lán)、黑、棕等)；作同一凝膠柱的掃描時(shí)，誤差較大。
    2．考馬斯亮藍(lán)R250(coomassie brilliant blue R250，簡(jiǎn)稱CBBR250或PAGE blue83)
考馬斯亮藍(lán)R250的分子式為C14H44O7H3S2Na，MW=824，λmax=560-590nm。染色靈敏度比氨基黑高5倍。該染料是通過范德瓦爾鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合，尤其適用于SDS電泳微量，但蛋白質(zhì)濃度超過一定范圍時(shí)，對(duì)高濃度不合乎Beer定律，作定量分析時(shí)要注意這點(diǎn)。
    3．考馬斯亮藍(lán)G250(簡(jiǎn)稱CBBＧ250或PAGE blue G90，又名xylene brilliant cyanin G)
考馬斯亮藍(lán)G250比CBB R250多二個(gè)甲基。MW=854，λmax=590-610nm。染色靈敏度不如R250，但比氨基黑高3倍。其優(yōu)點(diǎn)是在三氯yi酸中不溶而成膠體，能選擇地使而幾乎無本底色，所以常用于重復(fù)性好和穩(wěn)定的染色，適于作定量分析。
    4．銀染色法
此法是Switzer.R.C和Merril.CR首先提出的，它較CBB R250靈敏100倍。但染色機(jī)制
尚不清楚，可能與攝影過程Ag+的還原相似。其靈敏度很高，牛血清為4×10-5μg/mm2，即清蛋白為8×10-5μg/mm2，cyt C為1.7×10-4μg/mm2，因此也常用于凝膠電泳。