怎樣化凍動(dòng)物細(xì)胞？ 

化凍過(guò)程的原則是要讓凍存的細(xì)胞快速融化。 

如果細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮液面下，使用者準(zhǔn)備好必要的防護(hù)器具（至少要戴上護(hù)目鏡，戴上面罩和較厚的手套），防止進(jìn)入凍存管的液氮驟然膨脹引起爆炸而造成傷害（筆者曾經(jīng)在化凍的時(shí)候，為了防止污染，把冷凍管放到一個(gè)15ml離心管中，而且把蓋子擰上了，打算放到 37℃水浴，恰好回過(guò)頭去和別人談話，忽然聽(tīng)到一聲爆炸聲，回頭一看，15ml的離心管就剩下蓋子了，其他的都爆飛了）。從冰箱或液氮罐取出細(xì)胞后將凍存管放 37℃水浴輕輕晃動(dòng)使之化凍*，注意不要讓水浸到蓋子以防污染發(fā)生。 

由于大多防凍劑與細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間接觸時(shí)對(duì)細(xì)胞有毒害，所以盡快除去細(xì)胞凍存時(shí)加入的防凍劑。

防凍劑的去除方式和細(xì)胞的敏感性有關(guān)。有些細(xì)胞在某些防凍劑存在的條件下能很好的貼壁生長(zhǎng)，可以直接將化凍的凍存細(xì)胞連同其凍存液加入預(yù)備好 15-20ml 培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，輕輕混勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜后換培養(yǎng)液。 

對(duì)于敏感細(xì)胞要加入 10ml 培養(yǎng)液中， 100xg 離心 5 分，去上清后加培養(yǎng)液輕輕重懸細(xì)胞，加入培養(yǎng)器皿后在培養(yǎng)箱培養(yǎng)，第二天更換培養(yǎng)液。