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四環(huán)素類藥物快速檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號CFC038D

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更新時間：2016-03-14 13:18:41瀏覽次數(shù)：577次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：66條

所在地區(qū)：江蘇蘇州市

聯(lián)系人：盛經(jīng)理（主管）

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產(chǎn)品簡介

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物四環(huán)素類藥物將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭四環(huán)素類藥物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物四環(huán)素類藥物的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物四環(huán)素類藥物的含量。

詳細(xì)介紹

【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】

規(guī) 格：96孔/盒
靈敏度： 0.05ppb
檢測時間： 75min
樣本檢測下限：
組織樣本（雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚、雞蛋）：
四環(huán)素 ………………………………………………0.3ppb
二甲胺四環(huán)素 ………………………………………0.3ppb
吡四環(huán)素 ……………………………………………0.3ppb
* ………………………………………………0.3ppb
脫甲基*……………………………………… 0.6ppb
*………………………………………………0.6ppb
*……………………………………………0.9ppb
蜂蜜樣本：
四環(huán)素……………………………………………… 2ppb
二甲胺四環(huán)素……………………………………… 2ppb
吡四環(huán)素…………………………………………… 2ppb
* ………………………………………………2ppb
脫甲基*………………………………………6ppb

*………………………………………………4ppb
*……………………………………………6ppb
交叉反應(yīng)率：
四環(huán)素 ……………………………………………*
二甲胺四環(huán)素…………………………………… 125%
吡四環(huán)素 ………………………………………… 110%
* …………………………………………… *
脫甲基*…………………………………… 35%
* …………………………………………… 58%
* …………………………………………… 45%
樣本回收率：
組     織   …………………………………… 85%±20%
蜂     蜜 …………………………………… 75%±20%
【試劑盒組成】
1、微量測試孔：1×96孔板（12條×8孔）
2、標(biāo)準(zhǔn)溶液X6瓶：（1ml/瓶）0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb
3、酶標(biāo)記物 12ml…………………………紅色帽
4、抗體工作液   7ml ………………………藍(lán)色帽
5、底物A液      7ml ………………………白色帽
6、底物B液     7ml ……………………黑色帽
7、終止液     7ml ……………………黃色帽
8、 20X濃縮洗滌液40 ml ………………白色帽
9、 5X 濃縮復(fù)溶液   50ml •……………… 透明帽

【酶標(biāo)免疫分析程序】
??測定前應(yīng)須知：
1、使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫（20～25℃）。
2、使用之后立即將所有試劑放回2～8℃。
3、在ELISA 分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的*性，正確的洗板操作是ELISA 測定程序中的要點(diǎn)。
4、所有恒溫孵育過程，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。
??操作步驟：
1、從2～8℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑，室溫（20～25℃）平衡30min 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、配制標(biāo)準(zhǔn)液
制備四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液用
450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋并混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)液1：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液1 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 0ppb
標(biāo)準(zhǔn)液2：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液2 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 0.05ppb
標(biāo)準(zhǔn)液3：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液3 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 0.15ppb
標(biāo)準(zhǔn)液4：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液4 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 0.45ppb
標(biāo)準(zhǔn)液5：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液5 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 1.35ppb
標(biāo)準(zhǔn)液6：50μl 標(biāo)準(zhǔn)濃縮液6 用450μl 稀釋好的復(fù)溶液稀釋 4.05ppb
3、取出框架及需要數(shù)量的微孔，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。
4、配液：將40ml 20X 濃縮洗滌液用去離子水稀釋至800ml。
5、編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
6、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加加入抗體工作液50μl/孔，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻37℃環(huán)境中反應(yīng)30min。
7、將孔內(nèi)液體甩干，用已稀釋的洗滌液250μl/孔洗板4～5 次，每次間隔15～30 秒，用吸水紙拍干（拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
8、每孔加入酶標(biāo)記物100μl，蓋板膜蓋板后置37℃環(huán)境中反應(yīng)30min。將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液充分洗，4～5 遍（同上），用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
9、顯色：加入底物A 液50μl/孔，再加入底物B液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，37℃環(huán)境中避光顯色15min。
10、測定：加入終止液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm 處（建議用雙波長450/630nm 檢測，5min 內(nèi)讀數(shù)），測定每孔OD 值。
【結(jié)果判定】
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含克倫特羅的含量成負(fù)相關(guān)。
1、粗略判定：
    用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出
其濃度范圍（ng/ml）。假設(shè)樣本1 的吸光度值為0.3，
樣本2 的吸光度值為1.0，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是：
0ppb 為2.243； 0.05ppb 為1.816；0.15ppb 為1.415；0.45ppb 為0.74；1 .35ppb 為0.313；4 .05ppb 為0.155。則樣本1 的濃度范圍是1.35ppb～4.05ppb；樣本2的濃度范圍是0.15ppb～0.45ppb，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中四環(huán)素實(shí)際濃度。
1、定量分析：
所獲得的每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以*個標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值（B0）再乘以*，即百分吸光度值。
百分吸光度值（%）＝ B ×*

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）的半對數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中四環(huán)素實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣品的準(zhǔn)確、快速分析。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線：
B/B0 （%）

     0.05        0.15      0.45        1.35       4.05
                    四環(huán)素（ppb） [µg/kg]
           圖1：四環(huán)素檢測試劑盒的回歸曲線
4、再現(xiàn)性：
%CV

                            四環(huán)素（ppb） [µg/kg]
                 圖2：四環(huán)素檢測試劑盒的精密度
由多個不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定了精密度，圖2顯示出四環(huán)素檢測試劑盒的精密度情況，獲得的標(biāo)準(zhǔn)吸收值的變異系數(shù)（%CV）對相應(yīng)四環(huán)素濃度作曲線，可以看到在全部范圍內(nèi)變異系數(shù)如此之低，可以得到很好的再現(xiàn)性。
【注意事項(xiàng)】
1、使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標(biāo)本沒有回到室溫（20-25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、混合要均勻，否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。
6、不用的微孔板放進(jìn)自封袋密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位（A450nm<0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。
8、該試劑盒*反應(yīng)溫度為37℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
【儲存】
原包裝應(yīng)儲存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號見外包裝。