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蘇州艾瑞德生物科技有限公司
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蘇州艾瑞德生物科技有限公司
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產(chǎn)品型號(hào)CFC035D
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地蘇州市
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更新時(shí)間：2016-03-16 00:38:38瀏覽次數(shù)：553次
聯(lián)系我時(shí)，請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物*將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗*抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物*的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物*的含量。
一、原理
本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的殘留物*將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗*抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物*的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物*的含量。
二、試劑盒特性
試劑盒靈敏度： 0.5ppb
樣本檢測(cè)下限
雞肉、雞肝、牛奶—————————————20ppb
蜂 蜜/蜂王漿— —— — —— — —— —————10ppb
交叉反應(yīng)率
* — — —— —— — — — — —— — — *
雙氫* ——————— —— — — —— —108%
卡拉霉素 —— — — — — — — — — — — — — < 1%
* — — —— — — — — — — — —— — < 1%
回收率
牛 奶— —— —— —— —— —— —— —95±15%
雞肉組織— —— —— —— —— —— —— —85±10%
蜂蜜/蜂王漿 — —— —— —— —— —— —75±15%
三、試劑盒組成
1、 微量測(cè)試孔：每條8孔，一板12條
2、 標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶：（1ml/瓶）0ppb、0.5ppb、1.5ppb、4.5ppb、13.5ppb、40.5ppb
3、 酶標(biāo)記物 7ml ……………… 紅色帽
4、 抗體工作液 7ml ……………… 藍(lán)色帽
5、 底物液 A液 7ml ……………… 白色帽
6、 底物液 B液 7ml ……………… 黑色帽
7、 終止液 7ml ……………… 黃色帽
8、20×濃縮洗滌液 40ml ……………… 白明帽
9、10×濃縮復(fù)溶液 50ml ……………… 透明帽
六、 酶標(biāo)免疫分析程序:
測(cè)定前應(yīng)須知：
1、 使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫（20-25℃）。
2、 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。
3、 在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的*性，正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。
4、 在所有恒溫孵育過(guò)程中，避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
操作步驟：
1、 從4℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑，置室溫（20-25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、 取出需要數(shù)量的微孔及框架，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。
3、 配液：將40ml濃縮洗滌液（20倍濃縮）用去離子水按照1：19稀釋（1份濃縮洗滌液+19份去離子水），或按所需用量配制洗滌液。
4、 編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl /孔，然后加酶標(biāo)記物50μl/孔，再加入抗體工作液50µl/孔。輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板，37℃環(huán)境反應(yīng)40min。
6、 取出用洗滌液按每孔250ul，洗板4－5次，每次浸泡15-30秒，拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
7、 顯色：每孔加入底物A液50ul，再加底物B液50ul，輕輕振蕩混勻，37℃環(huán)境中避光顯色20min。
8、 測(cè)定：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔OD值。
七.結(jié)果判定
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含*量成負(fù)相關(guān)。
1、粗略判定：
用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍（ng/ml）。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3，樣本2的吸光度值為1.0，標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是：0ppb為2.243；0.5ppb為1.816；1.5ppb為1.415；4.5ppb為0.74；13.5ppb為0.313； 40.5ppb為0.155。則樣本1的濃度范圍是13.5ppb-40.5ppb; 樣本2的濃度范圍是1.5ppb-4.5ppb，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際濃度。
2、定量分析
（1）百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值，再乘以*，即
百分吸光度值（%）＝ B ×*
B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0µg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以*標(biāo)準(zhǔn)品濃度（µg/L）的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。（索取）
八、 注意事項(xiàng)
1、 室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫（20-25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、 試劑混合要均勻，否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。
6、 將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、 試劑變質(zhì)的跡象
顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5（A450nm<0.5 ）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
8、 加A、B 液后一般顯色20min即可，若顏色較淺，可延長(zhǎng)顯色時(shí)間，但不能超過(guò)30min。
9、 該試劑盒*反應(yīng)溫度為37℃，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。
保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。
提示：酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣，酶標(biāo)板仍然正常有效，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)放心使用。
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