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萊克多巴胺快速檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號CFC034D

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所在地蘇州市

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更新時間：2016-03-13 22:18:06瀏覽次數(shù)：508次

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：66條

所在地區(qū)：江蘇蘇州市

聯(lián)系人：盛經(jīng)理（主管）

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產(chǎn)品簡介

萊克多巴胺屬于β-興奮劑類藥物，可提高胴體瘦肉率，曾被廣泛添加于飼料中。人食用了含萊克多巴胺殘留的動物性食品，會出現(xiàn)肌肉震顫、心悸、過敏、頭痛目眩、惡心、嘔吐、發(fā)燒、顫栗等癥狀，世界各國已明文禁止其使用。常規(guī)儀器檢測方法不能滿足實際生產(chǎn)中大批量檢測的需求。萊克多巴胺快速檢測試劑盒具有方便、快速、靈敏等特點，適用于大批量樣品快速檢測。

詳細介紹

【測定原理】

本試劑盒采用間接競爭ELISA法檢測尿樣和組織等樣本中的萊克多巴胺，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應(yīng)的原理來進行，樣本中的克倫特羅和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭標記有辣根過氧化酶的抗萊克多巴胺抗體，通過洗滌后，用TMB底物顯色，樣品中的萊克多巴胺含量與樣品的吸光度值呈反比，與標準曲線比較即可得出萊克多巴胺含量。
【試劑盒技術(shù)指標】
規(guī)      格：96孔/盒
靈敏度： 0.1ppb
檢測時間： 45min
樣本檢測下限：
尿     樣 …………………………………   0.1ppb
組    織（處理法一）…………………… 0.4ppb
肉樣本（處理法二）…………………… 0.1ppb
肝樣本（處理法二）…………………… 0.2ppb
飼    料 …… ……………………………   1ppb
交叉反應(yīng)率：
萊克多巴胺（Ractopamine）……………… *
克倫特羅（Clenbuterol）…………………    <0.1%
*（Salbutamol ）…………………    <0.1%
多巴酚丁胺（dobutamine）………………   <0.1%
樣本回收率：
尿     樣   ……………………… 95%±10%
組     織   ……………………… 85%±15%
飼     料   ……………………… 85%±15%
【試劑盒組成】
1、微量測試孔：1×96孔板（12條×8孔）
2、（Clenbuterol標準溶液X6瓶：（1ml/瓶）0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
3、酶標記抗體工作液 10ml………………綠色帽
4、底物A液     7ml ……………………白色帽
5、底物B液     7ml ……………………黑色帽
6、終止液     7ml ……………………黃色帽
7、 20X濃縮洗滌液40 ml ………………透明帽

酶標免疫分析程序
測定前應(yīng)須知：
1、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫（20-25℃）。
2、使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。
3、在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的*性，正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。
4、在所有恒溫孵育過程中，避免光線照射，用蓋板膜封住微孔板。
操作步驟：
1、將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20-25℃）平衡30min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃不要冷凍。
3、編號：將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
4、加標準品/樣本20µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記抗體80µl/孔，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻，25℃環(huán)境中反應(yīng)30min。
5、小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用去離子水250µl/孔充分洗滌4-5次，每次間隔15-30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
6、顯色：每孔加入底物A液50µl，再加底物B液50µl，輕輕振蕩混勻25℃環(huán)境避光顯色15min。
7、測定：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm，檢測在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)）測定每孔OD值。
【結(jié)果判定】
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與其所含萊克多巴胺量成負相關(guān)。
1、用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出其濃度范圍（ng/ml）。例如樣本1的吸光度值為0.311，樣本2的吸光度值為0.715，標準品吸光度值分別是： 0ppb為1.642；0.1ppb為1.200；0.3ppb為0.780；0.9ppb為0.454； 2.7ppb為0.236；8.1ppb為0.142。則樣本1的濃度范圍是0.9ppb-2.7ppb，樣本2的濃度范圍是0.3ppb-0.9ppb。乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中萊克多巴胺的實際濃度。
2、定量分析
（1）百分吸光率的計算，標準品或樣本的百分吸光率等于標準品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以*個標準（0標準）的吸光度值，再乘以*，即
百分吸光度值（%）＝ B ×*

B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標準溶液的平均吸光度值
（2）標準曲線的繪制與計算
以標準品百分吸光率為縱坐標，以萊克多巴胺標準品濃度（ng/ml）的半對數(shù)為橫坐標，繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中萊克多巴胺的實際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算，更便于大量樣本的準確、快速分析。（索?。?/span>
3、標準曲線：
B/B0 （%）

                          Ract（ppb） [µg/kg]
              圖1：萊克多巴胺檢測試劑盒的回歸曲線
4、再現(xiàn)性：
%CV

                             Ract （ppb） [µg/kg]
                  圖2：萊克多巴胺檢測試劑盒的精密度
由多個不同的實驗結(jié)果確定了精密度，圖2顯示出萊克多巴胺檢測試劑盒的精密度情況，獲得的標準吸收值的變異系數(shù)（%CV）對相應(yīng)萊克多巴胺濃度作曲線，可以看到在全部范圍內(nèi)變異系數(shù)如此之低，可以得到很好的再現(xiàn)性。
【注意事項】
1、使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標本沒有回到室溫（20-25℃）會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會伴隨著出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3、混合要均勻，否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒，稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號的盒中試劑。
6、不用的微孔板放進自封袋密封；標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位（A450nm<0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。
8、該試劑盒*反應(yīng)溫度為25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
【儲存】
原包裝應(yīng)儲存于2～8℃保鮮冷藏，切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號見外包裝。