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行業(yè)產(chǎn)品

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司


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*檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)CFC030D

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地蘇州市

聯(lián)系方式:盛經(jīng)理查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2016-03-17 02:00:59瀏覽次數(shù):394次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:66條

所在地區(qū):江蘇蘇州市

聯(lián)系人:盛經(jīng)理 (主管)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物*與微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)其抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含*的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出殘留物*的含量。

詳細(xì)介紹

 

【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】   
規(guī)      格:96孔/盒
靈 敏 度: 1ppb
檢測(cè)時(shí)間: 80min
樣本檢測(cè)下限:
雞 肉 / 肝、豬 肉 / 肝、雞蛋、蜂 蜜 ……………… 1 p pb
血 清、尿 液…………………………………………4ppb
牛          奶 …………………………………………  2 0 ppb
樣本回收率
雞 肉/ 肝、豬 肉 / 肝…………………………90% ±10%
雞        蛋   ……………………………………65% ±10%
蜂 蜜、牛奶、血清  …………………………70% ±10%
試劑盒組成
1、微量測(cè)試孔:每條8孔,一板12條
2、標(biāo) 準(zhǔn) 液×6瓶:(1ml/瓶) 0ppb、 1ppb、3ppb、9ppb、 27ppb、 81ppb
3、酶標(biāo)記物   7ml  ……………………………… 紅色帽
4、抗體工作液 10ml …………………………… 藍(lán)色帽
5、底物A液    7ml ………………………………白色帽
6、底物B液 7 ml………………………………黑色帽
7、終止液        7 ml ………………………………黃色帽
8、20X濃縮洗滌液40 ml………………………白色帽
     2X濃縮復(fù)溶液 50 ml……………透明帽
【所用儀器、試劑】   
具備的儀器:微孔酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:?jiǎn)蔚?0µl-200µl,100µl-1000µl、多道250µl
試       劑:乙酸乙酯、NaH2PO4•2H2O、Na2HPO4•12H2O、正己烷   
【樣本前處理步驟】   
樣本前處理須知
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測(cè)的組織樣本包括:動(dòng)物組織、禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚、蝦等。
(b)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(c)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本處理前需配制:
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測(cè)的組織樣本包括:動(dòng)物組織、禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚、蝦等。
(b)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
(c)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
樣本前處理需配制:
配液1、0.02MPB緩沖液
            稱取2.58g Na2HPO4•12H2O和0.44g NaH2PO4•2H2O加去離子水500ml溶解。
配液2、樣本復(fù)溶液:
           將2×濃縮復(fù)溶液用去離子水以1:1?。?份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水),用于樣本提取后 的復(fù)溶。
(a )動(dòng)物組織(肌肉、肝臟等)、雞蛋、蝦、魚等
1、稱取2±0.05g組織樣本于離心管中,加入6ml乙酸乙酯,充分混勻5min,于15℃,4000r/min以上速度離心10min;
2、移取3ml上清液至干凈的玻璃管中,于50℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?br /> 3、加入已稀釋好的復(fù)溶液1ml混勻,再用正己烷1ml混合30s。室溫4000r/min,離心5min,除去上層液;
4、取20µl下層用于分析。
      樣本稀釋倍數(shù):1
注:在使用國(guó)家規(guī)定zui高殘留*(100ppb)進(jìn)行判定時(shí),需進(jìn)行5倍稀釋(1份樣本液+4份已稀釋好的復(fù)溶液)。
4、取20µl下層用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):1倍
注:在使用國(guó)家規(guī)定zui高殘留*(100ppb)進(jìn)行判定時(shí),需進(jìn)行5倍稀釋(1份樣本液+4份已稀釋好的復(fù)溶液)。
(b) 血清樣本
1、將血樣本于室溫放置30min,于10℃,4000r/min以上離心10min,分離出血清或過濾血清;
2、 取1ml血清,加入3ml 0.02 M PB緩沖液混合,混合30s;
3、 取20µl液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):4倍  
(c)蜂蜜
1、 稱取1±0.05g蜂蜜樣本于50ml離心管中,加入2ml 0.02MPB緩沖液溶解;
2、 加入8ml乙酸乙脂振蕩5min,4000r/min以上室溫離心10min;
3、 取4ml上層液體于50℃下氮?dú)獯蹈桑?.5ml 已稀釋好的復(fù)溶液復(fù)溶,混合30s;
4、 取20µl液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):1倍
(d)尿液
1、 用3ml0.02 M PB緩沖液與1ml經(jīng)離心后的清亮尿樣本混合,混合30s;
2、 取20µl液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):4倍   
(e)牛奶
1、取1ml牛奶樣本用0.02 M PB緩沖液按1︰19(v/v)稀釋(即20µl牛奶+380µl 0.02 M PB緩沖液),混合30s;
2、取20µl液體用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):20倍      
【酶標(biāo)免疫分析程序】   
測(cè)定前應(yīng)須知:
1、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫(20-25℃)。
2、使用之后立即將所有試劑放回2-8℃環(huán)境。
3、在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性,正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。
4、在所有恒溫孵育過程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。
操作步驟:
1、 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置室溫(20-25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、 按板架及需要取出微孔條,將不用的微孔放入自封袋,保存于2-8℃。
3、 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。
4、 編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本20µl /孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50μl/孔,再加入80µl /孔的抗體工作液,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板,25℃環(huán)境中反應(yīng)60min 。
6、 取出酶標(biāo)板甩出孔內(nèi)液體后用洗滌液按每孔250µl,洗板4-5次,每次浸泡15-30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
7、 顯色:每孔加入A液50µl,再加B液50µl,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光顯色20min。
8、 測(cè)定:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定吸光度值(OD值)。
【結(jié)果判定】   
結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與磺胺類藥物的含量成負(fù)相關(guān)。 
1、 粗略判定
      用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng /ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值0.211,樣本2的吸光度值為0.785,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb為2.140;1ppb為1.560;3ppb為1.124;9ppb為0.650; 27ppb為0.328;81ppb為0.125。則樣本1的濃度范圍是27ppb-81ppb;樣本2的濃度范圍是3ppb-9ppb。乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際含量。
2、 定量分析
(1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以*,即:
百分吸光度值(%) = B ×*
  
B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以*濃度(ng /ml)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中*實(shí)際含量。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索?。?br /> 3、 標(biāo)準(zhǔn)曲線:
B/B0 (%)
 
       1              3             9            27            81
                       (ppb) [µg/kg]
     圖1:*檢測(cè)試劑盒的回歸曲線

4、再現(xiàn)性:
    %CV
  
          0         1          3         9        27       81
                          (ppb) [µg/kg]
        圖2:*檢測(cè)試劑盒的精密度
由多個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定了精密度,圖2顯示出的精密度情況,獲得的標(biāo)準(zhǔn)吸收值的變異系數(shù)(%CV)對(duì)相應(yīng)*濃度作曲線,可以看到在全部范圍內(nèi)變異系數(shù)如此之低,可以得到很好的再現(xiàn)性。
【注意事項(xiàng)】   
1、 使用前將所有試劑溫度回升至室溫20-25℃。試劑及標(biāo)本沒有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、 混合要均勻,否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、 不要使用過了有效日期的試劑盒,稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值的變化。不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。
6、 不用的微孔板放進(jìn)自封袋密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm<0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
8、 該試劑盒*反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
【儲(chǔ)存】
原包裝應(yīng)儲(chǔ)存于2~8℃保鮮冷藏,切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個(gè)月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號(hào)見外包裝。



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