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萊克多巴胺ELISA試劑盒

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蘇州艾瑞德生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

歡迎訪問(wèn)公司：http://www.ardbio.cn 蘇州艾瑞德生物科技有限公司是一家*的生物科研產(chǎn)品與合同供應(yīng)商，是國(guó)內(nèi)專注于食品安全檢測(cè)、動(dòng)物疫病檢測(cè)以及相關(guān)領(lǐng)域的高科技生產(chǎn)型企業(yè)。*以來(lái)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定*，并與國(guó)內(nèi)的檢驗(yàn)檢疫管理部門及*科研院所等機(jī)構(gòu)密切合作，研究開(kāi)發(fā)*的檢測(cè)技術(shù)及產(chǎn)品?？擅鎸?duì)大型檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)自有實(shí)驗(yàn)室提供全系列產(chǎn)品和有效的。

詳細(xì)介紹

一、用途
萊克多巴胺屬β-受體激動(dòng)劑類藥物，人體食入易出現(xiàn)毒副作用，因此許多國(guó)家都將其列為違禁藥物。*、*、*發(fā)出的公告明確禁止萊克多巴胺在食用動(dòng)物中使用。 HPLC或GC-MS一直用作檢測(cè)β-興奮劑的方法，但是其前處理步驟繁瑣，費(fèi)用昂貴。酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒則可經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)尿，肌肉，肝臟及飼料中的萊克多巴胺。本試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)免疫法定量測(cè)定尿樣、肝臟、水、飼料和肌肉中的萊克多巴胺。

二、測(cè)定原理
萊克多巴胺檢測(cè)試劑盒是利用免疫學(xué)直接競(jìng)爭(zhēng)法的原理，固相載體微孔板上包被有萊克多巴胺蛋白偶聯(lián)物，加入待測(cè)萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液及萊克多巴胺的酶標(biāo)記物抗體，包被在微孔板上的萊克多巴胺蛋白偶聯(lián)物和標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的萊克多巴胺競(jìng)爭(zhēng)性地與酶標(biāo)記物抗體結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物；洗滌后加入顯色劑，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無(wú)色的顯色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物；加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色；在450 nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，樣品中的萊克多巴胺濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。

三、試劑盒組成
(1)96孔酶標(biāo)板：   1塊 96T/8孔。
(2)標(biāo)準(zhǔn)品：      0 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.9 ppb、2.7 ppb、8.1 ppb(1mL/瓶)
(3) 酶標(biāo)記物：       1瓶(7 mL)。
(4)底物緩沖液：      1瓶(7 mL)。
(5)底物液：          1瓶(7 mL)。
(6)終止液：          1瓶(7 mL)。
(7)20倍濃縮洗滌液： 1瓶(50 mL)，加蒸餾水稀釋到1000 mL 。
(8)使用說(shuō)明書(shū)        1 份
(9)封板膜：          2 張
(10)封口袋：         1 個(gè)

四、技術(shù)參數(shù)
靈敏度：0.1 ppb
半抑制濃度(IC50)：≤1.0 ppb
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：0.1-8.1 ppb
精確度：板內(nèi)變異誤差小于10%，板間變異誤差小于15%
準(zhǔn)確性(回收率)：尿液、組織、飼料：100±20%

五、交叉反應(yīng)活性：
Analytes                                          Cross-reactivity
Ractopamine                                   100.0
Ractopamine Gluc.A                         1.0
Ractopamine Gluc B                         5.8
Ractopamine Gluc C                         387.0
(1S,3S) –Ractopamine                    1.9
(1R,3S)-Ractopamine                       0.9
(1S,3R)-ractopamine                       98.5
(1R,3R)-ractopamine                       451.7
Dobutamine                                     0.1
Ritodrine                                         2.4
Isoxsuprine                                     0.1
Salmeterol                                       0.1
Fenoterol                                         0.1
Clenbuterol                                  <0.01
Salbutamol                                   <0.01

六、樣品處理
1．尿樣 (稀釋倍數(shù)為1)
取50 μL尿樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。渾濁尿樣以4000 r/min離心5分鐘，取上清(清亮部分)。
2．組織 (稀釋倍數(shù)為1)
a．取2g±0.05 g組織，加入6 mL乙腈-0.1 M HCl(V乙腈：VHCl=84：16)，振蕩10 min,室溫4000 r/min以上離心10 min。
b．取上清3 mL，加入2 mL 0.1M NaOH，加入6 mL乙酸乙酯，振蕩10 min，室溫4000 r/min以上離心10 min。取全部上清于50 ℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈伞?br />C．加入1 mL雙蒸水復(fù)溶，取50 μL進(jìn)行分析。
3．飼料(稀釋倍數(shù)10)：
用研缽研碎飼料，稱1 g研碎的飼料樣品加入2 mL的0.01 M的PBS，渦旋5分鐘。用20000 rpm離心5分鐘，轉(zhuǎn)移出上清液。吸取10 μL加入40 μL0.01 M的PBS中進(jìn)行檢測(cè)。

七、操作步驟
1．將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出，置室溫(20-25 ℃)平衡田30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2．按需要取出微孔條及板架，將不用的微孔板重新密封，保存于2-8 ℃，不要冷凍。
3．加入50 μL樣品或標(biāo)準(zhǔn)品到微孔板中，再加入50 μL酶標(biāo)記物到微孔板中，充分振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，室溫下反應(yīng)30 min(或37℃下反應(yīng)20 min)。
4．棄去孔中液體，每孔注滿稀釋好的濃縮稀釋液，輕輕振蕩，棄去孔中液體，并在吸水紙上拍干，重復(fù)6次。
5．加入50 μL底物液緩沖液，再加入50 μL底物液，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，在室溫(或37℃)暗處孵育10 min。
6．加入50 μL終止液到微孔板中，混合好在450 nm處測(cè)量吸光度值，必須在加入終止液后20 min內(nèi)讀取光度值。

八、注意事項(xiàng)
1．使用之前將所有試劑回升至室溫，使用之后立即將所有試劑放回2-8 ℃。在EIA分析中的重復(fù)性，很大程度上取決于洗板的*性，仔細(xì)按照*的洗板順序操作是EIA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。
2．終止液為2M ，避免接觸皮膚。
3．不要使用過(guò)了有效日期的萊克多巴胺檢測(cè)試劑盒，不同批次、不同試劑盒之間的試劑等內(nèi)容不可混用，以免降低靈敏度。
4．0標(biāo)準(zhǔn)品的OD值小于0.5時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)，請(qǐng)勿使用。
5．顯色劑變藍(lán)，表明已變質(zhì)，請(qǐng)勿使用。

九、儲(chǔ)存條件
1． 2-8℃保存，切勿冷凍。
2．將不用的酶標(biāo)板放進(jìn)帶干燥劑的封口袋中密封保存。
3．酶標(biāo)記物和顯色液對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。