CellSorter單細(xì)胞微操縱分選系統(tǒng)
背景：
單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)主要是基于以下特點(diǎn)：
1.單細(xì)胞亦包含一個(gè)物種全部的遺傳信息；
2.單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)避免了細(xì)胞異質(zhì)性的干擾，準(zhǔn)確性更高。
3.單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)有利于還原生物事件本身，諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細(xì)胞為起點(diǎn)。
概述
匈牙利Cellsorter公司推出的單細(xì)胞獲取及實(shí)施跟蹤分析平臺為獲取單細(xì)胞提供了完整的解決方案—全自動 Cellsorter單細(xì)胞高精準(zhǔn)抓取分選系統(tǒng)。
Facsinapetri可從血液、骨髓、制備的組織細(xì)胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細(xì)胞,并可利用利用*的picovitro單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析培養(yǎng)板進(jìn)行后期的單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析。
cellsorter單細(xì)胞抓取分選實(shí)時(shí)跟蹤分析系統(tǒng)以顯微鏡為基礎(chǔ)，采用計(jì)算機(jī)自動控制毛細(xì)管技術(shù)從少量血液、骨髓、制備的各種組織細(xì)胞懸浮液任何單一類型細(xì)胞或稀有細(xì)胞（如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞以及血液、骨髓中相關(guān)細(xì)胞等）的分離抓取，操作步驟是由軟件控制。
整個(gè)過程分為三個(gè)步驟：
1．細(xì)胞識別
2．細(xì)胞獲取
3．細(xì)胞沉積
4．單細(xì)胞分析- the ultimate tool for single cell analysis!
抓取篩選的細(xì)胞可沉積到玻璃載片或者PCR管中,玻璃載片可以承載多大384個(gè)細(xì)胞,也可與picovitro單細(xì)胞跟蹤分析培養(yǎng)板聯(lián)用，進(jìn)行各種細(xì)胞之間、DNA、RNA和蛋白質(zhì)生物合成之間的相互作用分CellSorter單細(xì)胞微操縱分選系統(tǒng)
Facs in a petri單細(xì)胞抓取分選實(shí)時(shí)跟蹤分析系統(tǒng)是Cellsoter公司一款主要用于識別、挑取、轉(zhuǎn)移懸液中單細(xì)胞或者單一類型細(xì)胞，然后利用picovitro單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析培養(yǎng)板進(jìn)行后期的單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析。借助高清晰度的CCD 攝像機(jī)成像，操作者可直觀看到目的細(xì)胞，隨后通過操控軟件控制毛細(xì)管高效地完成對懸浮細(xì)胞或者是貼壁細(xì)胞的挑取及轉(zhuǎn)移。整個(gè)過程可視化，操作簡單，挑取準(zhǔn)確，跟蹤分析實(shí)時(shí)方便。對于各種類型的單個(gè)細(xì)胞挑取、分析游刃有余。
該系統(tǒng)通過細(xì)胞識別、細(xì)胞挑取和細(xì)胞轉(zhuǎn)移、跟蹤實(shí)時(shí)分析四個(gè)步驟可以實(shí)現(xiàn)對懸浮體系中任何單一類型細(xì)胞或稀有細(xì)胞（如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞以及血液、骨髓中相關(guān)細(xì)胞等）的抓取分離、分析，細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移到PCR管等后續(xù)實(shí)驗(yàn)裝置.
該系統(tǒng)以“所見即所得”的方式，幾乎涵蓋所有的單細(xì)胞獲取途徑，結(jié)合picovitro單細(xì)胞實(shí)時(shí)跟蹤分析培養(yǎng)板可進(jìn)行下游基因、蛋白水平的研究。
Facs in a petri 單細(xì)胞抓取分選實(shí)時(shí)跟蹤分析系統(tǒng)在培養(yǎng)碟中原位自動分選細(xì)胞，具有高精度、細(xì)胞存活率高、純度高，而且不破壞細(xì)胞組織的特性，是高精準(zhǔn)、全自動分選沉積單細(xì)胞的*。
系統(tǒng)優(yōu)勢
1).可直接從培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞分選
2).分離粘結(jié)活細(xì)胞的細(xì)胞亞群，分離熒光或者冷光標(biāo)記
3).無標(biāo)記的和熒光的細(xì)胞都可通過軟件進(jìn)行自動識別
4).可確保細(xì)胞分離后活力，并且可培養(yǎng)
5).分選熒光分子探針標(biāo)記的特定細(xì)胞
6).單細(xì)胞收集進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)、克隆，RNA或者蛋白質(zhì)制備
7).免疫制備，進(jìn)行目標(biāo)細(xì)胞分類
8).可對各種粘結(jié)細(xì)胞進(jìn)行分類
9).細(xì)胞篩選前的細(xì)胞培養(yǎng)
10).一般的分選過程只需幾分鐘就可完成
11).使用安裝在顯微鏡上的熒光濾片可實(shí)現(xiàn)多通道監(jiān)測
12).分選速度：1Cell/秒,可以一次性連續(xù)分選1000個(gè)細(xì)胞；
13).每一次可連續(xù)分選分揀出細(xì)胞個(gè)數(shù)：1~1000
14).自動化集成度高，工作效率高
速率為1Cell/秒,高通量分離，通過軟件自動標(biāo)定并進(jìn)行連續(xù)運(yùn)行，單次連續(xù)運(yùn)行多可以分離多達(dá)200個(gè)細(xì)胞；
多次連續(xù)運(yùn)行可以達(dá)到1000個(gè)細(xì)胞以上。
15).儀器操作準(zhǔn)確性：
可在細(xì)胞懸液中進(jìn)行單細(xì)胞自動分離，*自動化的單細(xì)胞操作，人工干預(yù)少 避免了細(xì)胞異質(zhì)性的干擾，準(zhǔn)確性更高
16). 針對細(xì)胞種類: 血液、骨髓、制備的各種組織細(xì)胞懸浮液,任何單一類型細(xì)胞或稀有細(xì)胞（如循環(huán)腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞以及血液、骨髓中相關(guān)細(xì)胞等）的分離,可保證細(xì)胞分離后活力，保證細(xì)胞可培養(yǎng)性
17).小操控體積:1nL——10 nL
18). 穩(wěn)定性:工作穩(wěn)定性強(qiáng)，可以單次連續(xù)高精度運(yùn)行上百次，經(jīng)過Nature專家組驗(yàn)證，相關(guān)報(bào)告已經(jīng)在Nature子刊發(fā)表
19)自動單細(xì)胞沉積功能：
19.1)單細(xì)胞輸送到達(dá)每一個(gè)PCR管
19.2)滴液體積小于1ul
19.3)一個(gè)循環(huán)可裝滿80個(gè)PCR管
19.4)每個(gè)Cell沉積時(shí)間15~20秒
19.5)可在一個(gè)玻璃蓋玻片上原位測試單個(gè)細(xì)胞沉積
20)自動單細(xì)胞沉積到PCR管
20.1)可將單細(xì)胞移動到每一個(gè)PCR管中
20.2)一個(gè)循環(huán)可填滿10PCR條，容納80個(gè)管
20.3)蓋玻片單細(xì)胞原位沉積試驗(yàn)
20.4)小滴定體積優(yōu)于1ul
20.5)15~20秒每個(gè)細(xì)胞
21)計(jì)算機(jī)控制單元
全自動*控制臺可通過計(jì)算機(jī)USB接口控制流體閥和顯微LED照明光源，同時(shí)也可以自由地控制顯微鏡熒光快門，并且整合了高速控制閥實(shí)現(xiàn)流體快速、精密控制。
22)設(shè)備特點(diǎn)
22.1)兼容所有的倒置顯微鏡
22.2)快速手動調(diào)節(jié)通過LED照明光源
22.3)分選針頭更換快速、便捷
22.4)可通過連接環(huán)完美的安裝到顯微鏡的物鏡上
該系統(tǒng)配備高精度微移液管支架，控制臺始終保證微量吸液管位于視場的正中心， 并且微移液管控制臺可非常容易地安裝在物鏡上，同時(shí)軟件可對移液管的位置進(jìn)行偏差校準(zhǔn)。
微移液管的可通過轉(zhuǎn)動控制臺的旋鈕進(jìn)行手動聚焦，且微移液管的科在顯微鏡中非常容易的被觀察到，同時(shí)顯微鏡的圖像可跟進(jìn)調(diào)整； 玻璃微移液管更換非常便捷，當(dāng)更換培養(yǎng)皿時(shí)簡單地取下來分選針頭即可。
CellSorter微量吸液管非自動化的細(xì)胞沉積平臺
a．微量吸液管的路徑。
在一個(gè)典型的分類過程中，可根據(jù)路徑對細(xì)胞進(jìn)行逐個(gè)提取，有200個(gè)細(xì)胞從培養(yǎng)皿中被提取。比例尺：100μm。
b．硬件仿真模擬的控制軟件。
在虛擬的培養(yǎng)皿中，熒光細(xì)胞被標(biāo)記為綠色小球，通過微量吸液管對細(xì)胞進(jìn)行提取。
c．微量吸液管定位裝置微量吸液管布局圖。
控制臺通過物鏡環(huán)固定在物鏡上方，玻璃微量吸液管被固定在控制臺中心光軸位置。微量吸液管頂端通過LED燈照射，照射光通過微量吸液管直接被引入到物鏡。微量吸液管可通過手動調(diào)節(jié)彈簧旋鈕上下移動到物鏡焦點(diǎn)位置。培養(yǎng)皿可以進(jìn)行水平移動，微量吸液管上端通過撓性導(dǎo)管連接到*上。
玻璃微移液管
全自動細(xì)胞分析儀使用微量吸液管對細(xì)胞進(jìn)行分選，微量吸液管內(nèi)孔徑范圍為50~80um；
可根據(jù)客戶的應(yīng)用提供良好的內(nèi)孔徑方案；更小的微移液管可達(dá)亞微米級，用于大分子的操縱。
CellSorter全自動單細(xì)胞抓取與實(shí)時(shí)分析系統(tǒng)
基本原理：
CellSorter通過負(fù)壓將細(xì)胞吸入毛
細(xì)管中，測量負(fù)壓作用下細(xì)胞的
形變及所用時(shí)間或測量細(xì)胞粘附
分離時(shí)的臨界負(fù)壓來評價(jià)細(xì)胞的
形變特性，并記錄細(xì)胞的挑取
數(shù)。之后通過正壓將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到
PCR管中，進(jìn)行其他相關(guān)的細(xì)胞
和分子實(shí)驗(yàn)等。
主要部件：
1. 含閥門控制器或分選頭的CellSorter主機(jī)
2. Zeiss Axio Observer熒光倒置顯微鏡
3. Marzhauser 顯微機(jī)械平移臺和控制桿
Rita Sala´nki et al, 2014
Péter K. Jania et al, 2016
主要特點(diǎn)：
1. 可從培養(yǎng)皿中直接挑取細(xì)胞
2. 分選后的細(xì)胞存活率可以達(dá)到90%以上
3. 每分鐘可分選3-4個(gè)細(xì)胞，每秒可捕獲1個(gè)細(xì)胞
4. 1個(gè)RUN可挑取的細(xì)胞總數(shù)可達(dá)1000個(gè)
5. 可實(shí)現(xiàn)納升級別的液滴處理精度
6. 硼硅玻璃毛細(xì)管，直徑5-70μm可定制
會員1.png)
