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當(dāng)前位置:廣州市格瑞林生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>小分子抗原制備服務(wù)
半抗原,又稱不完quan抗原(incomplete antigen),是指某些單獨(dú)存在時(shí)不能誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,即不具備免疫原性,只有免疫反應(yīng)性(抗原性),但當(dāng)與大分子蛋白質(zhì)或非抗原性的多聚賴氨酸等載體交聯(lián)或結(jié)合后形成完quan抗原,可獲得免疫原性,從而誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的小分子物質(zhì)。
小分子化合物抗原是最典型的半抗原,常見的半抗原有多糖、類脂、核酸和某些小分子化合物和藥物等。一些小分子半抗原若具有活性基團(tuán),如-COOH、-NH2、-OH等,可以跟載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián),制備完quan的人工抗原。
如果半抗原沒有可直接與載體共價(jià)連接的基團(tuán),或雖有活性基團(tuán)但這些基團(tuán)對(duì)維系半抗原的免疫特性和特征結(jié)構(gòu)十分重要,或直接與載體蛋白連接后半抗原的特征結(jié)構(gòu)易受載體的局部微化學(xué)環(huán)境或空間位阻的干擾影響機(jī)體的免疫反應(yīng),則必須要對(duì)半抗原小分子進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,合成修飾化的半抗原。
如果待測(cè)物本身含有NH2,COOH,OH等活性基團(tuán),可以利用待測(cè)物活性基團(tuán)加入間隔臂,然后聯(lián)入載體蛋白就可以成功合成人工抗原,制備特異性良好的抗體。常用的載體包括牛血清白蛋白BSA、鑰孔血藍(lán)蛋白KLH、卵清蛋白OVA等。對(duì)于載體蛋白的選擇,主要涉及其溶解性、大小、偶聯(lián)基團(tuán)、免疫原性、成本價(jià)格等因素。
半抗原設(shè)計(jì)的基本原則如下:
1)免疫原中的半抗原應(yīng)在分子結(jié)構(gòu)、立體化學(xué)和電子分布上與待測(cè)物分子盡可能相似;
2)半抗原結(jié)構(gòu)中的連接臂應(yīng)不易于誘導(dǎo)產(chǎn)生“臂抗體",最好使用一定長(zhǎng)度的碳鏈;
3)半抗原分子應(yīng)具有便于與蛋白載體偶聯(lián)的活性基團(tuán)(如-NH2、-COOH、-OH、-SH等),且活性基團(tuán)的存在對(duì)待測(cè)物分子的電子分布應(yīng)沒有影響;
4)半抗原與蛋白偶聯(lián)后仍應(yīng)保留待測(cè)物分子的基本結(jié)構(gòu)。
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