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固定液的選擇
對(duì)于組分已知的樣品，如果難分離物質(zhì)對(duì)初步確定，那么選擇固定液的指標(biāo)就是使難分離物質(zhì)對(duì)達(dá)到定量分離。
l.按相似性原則選擇 按被分離組分的極性或官能團(tuán)與固定液相似的原則來選擇，這是因?yàn)橄嗨葡嗳艿木壒?。這樣，組分在固定液中的溶解度大，分配系數(shù)大，保留時(shí)間長(zhǎng)，分開的可能性就大。
(1)按極性相似選擇： ①非極性化合物應(yīng)首先選擇非極性固定液，這時(shí)組分與固定液分子間的作用力主要是色散力，組分基本上以沸點(diǎn)順序出柱，低沸點(diǎn)的先出柱。若樣品中有極性組分，相同沸點(diǎn)的極性組分先出柱。②中等極性化合物可中等極性固定液。分子間作用力為色散力和誘導(dǎo)力。基本上仍按沸點(diǎn)順序出柱。但對(duì)沸點(diǎn)相同的極性與非極性組分，誘導(dǎo)力起主導(dǎo)作用，極性成分后出柱。③強(qiáng)極性化合物，極性固定液。分子間主要作用力為定向力。組分按極性順序出柱，極性強(qiáng)的組分后出柱。
(2)按化學(xué)官能團(tuán)相似選擇：當(dāng)固定液與組分的化學(xué)官能團(tuán)相似時(shí)，相互作用力強(qiáng)，選擇性高。例如，被分離化合物為酯可選酯和聚酯固定液。化合物為醇可選醇類或等。
2.按主要差別選擇 若組分的沸點(diǎn)差別是主要矛盾，可選非極性固定液；若極性差別為主要矛盾，則選極性固定液?，F(xiàn)舉例說明：苯與環(huán)己烷沸點(diǎn)相差0.6℃(苯80.1℃，環(huán)己烷80.7℃)。而苯為弱極性化合物，環(huán)己烷為非極性化合物，二者極性差別雖然不大，但相對(duì)而言比沸點(diǎn)差別大，極性差別是主要矛盾。用非極性固定液很難將苯與環(huán)己烷分開。若改用中等極性的固定液，如用鄰苯二甲酸二壬酯，則苯的保留時(shí)間是環(huán)己烷的1.5倍。若再改用400，則苯的保留時(shí)間是環(huán)己烷的3.9倍。
3.按麥?zhǔn)舷喑?shù)選擇 由于麥?zhǔn)铣?shù)比較全面地描述了固定液的分離特征，因此根據(jù)麥?zhǔn)铣?shù)可較快地選擇適合于分離對(duì)象的固定液。例如，要分離正丁基醚和正丙醇，且正丙醇是雜質(zhì)，應(yīng)讓它先出峰，因此所選擇的固定液應(yīng)與正丁基醚的作用力強(qiáng)，與正丙醇的作用力弱。值越大的固定液對(duì)質(zhì)子受體的作用力越強(qiáng)；值越小的固定液對(duì)質(zhì)子給體的作用力越小。醚是質(zhì)子受體，醇是質(zhì)子給體，因此只有選擇具有高值的固定液，才能使正丙醇先于正丁基醚之前流出。從表2-2查得QF-l的=355/233=1.52，此值較大，可選作固定液。查得OV-210的=358/238=1.50，此值略小于QF-1，但OV-2l0的高使用溫度為275℃，而QF-l只有250℃。若采用較高柱溫，OV-210較合適。
填充柱氣相譜法使用的是填充色譜柱，既有氣液色譜也有氣固色譜，常見管材為不銹鋼、玻璃、聚四氟、銅、鋁等，除玻璃材質(zhì)外，其他種類的不易損。填充柱分離能力較差，柱效較低，但柱容量大，柱較短，因此分析時(shí)間較快。
填充柱是指填充了固定相的色譜柱。將色譜分析的固定相（吸附劑、涂漬了固定液的載體、離子交換樹脂、凝膠顆粒等）作為填料，填充于一定口徑、長(zhǎng)度和形狀的柱管中。填充柱的優(yōu)點(diǎn)是制備和使用方法都比較容易掌握，具有多種填料可供選擇，能滿足一般樣品分析要求。
毛細(xì)管色譜柱
色譜動(dòng)力學(xué)理論認(rèn)為，可以把氣-液填充柱看作一束涂了固定液的長(zhǎng)毛細(xì)管。由于這束毛細(xì)管是彎曲與多徑的，而引起渦流擴(kuò)散，使柱效降低。其次，填充柱的傳質(zhì)阻抗大，也使柱效降低。1957年Golay根據(jù)這個(gè)觀點(diǎn)，把固定液直接涂在毛細(xì)管管壁上，而發(fā)明了Golay柱，標(biāo)志著毛細(xì)管氣相色譜法的誕生。從80年代起，特別是近幾年來，毛細(xì)管柱制備技術(shù)不斷發(fā)展，新型毛細(xì)管柱不斷出現(xiàn)，為氣相色譜法開辟了新途徑。
(一)毛細(xì)管色譜柱的分類
按制備方法的不同，毛細(xì)管色譜柱可分為：
1.開管型毛細(xì)管柱
色譜柱柱壓過高是HPLC柱用戶常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因：
拆去保護(hù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護(hù)柱的問題，若柱壓仍高，再檢查
把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查
將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，(此時(shí)不要連接檢測(cè)器，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)性)。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，再檢查
更換柱子篩板，若柱壓下降，說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請(qǐng)與廠商聯(lián)系。
※如何正確選擇毛細(xì)管柱
柱長(zhǎng)度的選擇
分辨率與柱長(zhǎng)的平方根成正比。在其他條件不變的情況下，為**加倍的分辨率需有4倍的柱長(zhǎng)。較短的柱子適于較簡(jiǎn)單的樣品，尤其是由那些在結(jié)構(gòu)、極性和揮發(fā)性上相差較大的組分組成的樣品。
一般來說，15m的短柱用于快速分離較簡(jiǎn)單的樣品，也適于掃描分析；
30m的色譜柱是常用的柱長(zhǎng)，大多數(shù)分析在此長(zhǎng)度的柱子上完成；
50m、60m或較長(zhǎng)的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。
應(yīng)該注意，柱長(zhǎng)增加，分析時(shí)間也相應(yīng)地增加。
柱內(nèi)徑的選擇
柱內(nèi)徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。柱比大口徑柱有較高的柱效，但柱容量較小。
0·25：具有較高的柱效，柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。
0·32：柱效稍**0·25的色譜柱，但柱容量約高60％。
0·53：具有類似于填充柱的柱容量，可用于分流進(jìn)樣，也可用于不分流進(jìn)樣。
當(dāng)進(jìn)行痕量分析時(shí)，選擇大口徑毛細(xì)管柱較為合適。
液膜厚度的選擇
液膜厚度影響柱子的保留特性和柱容量。厚度增加，保留時(shí)間也增加。
0·1一0·2um：薄液膜的毛細(xì)管柱比厚液膜的毛細(xì)管柱洗脫組分快，所需柱溫低，且高溫下柱流失較小，適用高沸點(diǎn)的化合物的分析。
0·25一0·5um：常用的液膜厚度。
0·6一5·Ourn：厚液膜，對(duì)分析低沸點(diǎn)的化合物較為有利。
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