Thermo Scientific 蛋白 A Plus 瓊脂糖 NAb 離心柱便于對各種樣品類型中的抗體進行快速、小規(guī)模親和純化。每個柱包含 5 mL 固定化蛋白樹脂,可從 2-10 mL 血清或其他樣品中快速純化 5-65 mg IgG。純化的 IgG 實際量取決于樣品類型和使用的特定離心柱。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖是一種適合抗體純化的通用、高性能親和樹脂。它包含純化天然蛋白 A,共價固定于高密度、高質量的交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖中 (CL-6B)。在現(xiàn)有的許多各種形式固定化蛋白 A 親和樹脂中,本產品可提供通用的色譜特點組合,用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。
蛋白 A 是由多種菌株生成的一種細胞壁組分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結合位點,能夠與選定哺乳動物物種的 IgG 類抗體 Fc 區(qū)相互作用。IgG 結合功能在 pH 值 8.2 時,但在中性和生理緩沖液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效結合。
蛋白 A 是一種源自細菌的蛋白,對抗體(尤其是 IgG 類抗體)的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品(蛋白G)相比,蛋白A對兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結合力。蛋白A對人IgG也具有較高的結合力,但對IgG3的結合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結合作用較弱,因此不推薦用于大多數(shù)包含該抗體同種型的應用。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學法制備,該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學基團,從而避免了可能導致的非特異性結合,并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結合。所得的高結合容量樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留固定化蛋白 A 的結合功能。