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山東魯創(chuàng)分析儀器有限公司
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更新時間:2023-09-25 09:15:21瀏覽次數(shù):119次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線有效LC-3000液相色譜儀檢測“無抗奶"牛奶中β-內(nèi)酰胺酶方法“無抗奶",顧名思義,即不含抗生素的牛奶
“無抗奶",顧名思義,即不含抗生素的牛奶。早在2002年,這一概念便被提出,“無抗生素"的字樣也登上了乳品包裝。
為何牛奶含抗生素?
牛奶中的抗生素來自乳牛,乳牛被注射抗生素,主要是**乳腺發(fā)炎。乳腺炎是奶牛常見病,抗生素的使用是業(yè)內(nèi)“公開的秘密"。牛奶中的抗生素可能導(dǎo)致飲用者過敏,或因長期接觸抗生素而耐藥。
如何做到“無抗"?
藥品合理間隔期后才擠奶,可以無抗奶,可以通過檢驗抗生素的方式驗證。
有效LC-3000液相色譜儀檢測“無抗奶"牛奶中β-內(nèi)酰胺酶方法:
1、間接法
方法原理:利用β-內(nèi)酰胺酶能夠酶解的原理,向牛奶中添加一定量的,如果牛奶中存在一定濃度的β-內(nèi)酰胺酶,那么經(jīng)β-內(nèi)酰胺酶酶解后濃度會減少,從而判斷牛奶中是否存在β-內(nèi)酰胺酶。
實驗步驟:稱取20 g試樣,在4℃、16000rpm條件下離心10 min。取下層清液10 g于50 mL塑料離心管,并將塑料離心管置于37℃水浴鍋中振蕩孵育30 min。向孵育后的離心管中加入無水乙醇15 mL。振蕩提取30 min后離心,將上層清液過濾紙后收集于梨形瓶中。減壓濃縮蒸發(fā)掉乙醇。向旋蒸后的梨形瓶中加入10 mL磷酸鹽緩沖液(pH=8.5),渦旋1 min后調(diào)節(jié)pH為8.5。以1 mL/min的速度將提取液通過經(jīng)過預(yù)處理的Oasis HLB固相萃取柱,用2 mL磷酸緩沖液(pH=8.5)淋洗萃取柱,再用2 mL水淋洗。**用3 mL乙腈洗脫。將洗脫液在40℃下氮氣吹干,用0.025 M磷酸鹽緩沖液(pH=7.0)定容殘渣至1 mL,待上機測定。
色譜條件:
LC-3000有效液相色譜儀配UV-3000型紫外檢測器;
色譜柱 :C18(4.6mm×150mm×5μm);
流動相: 甲醇/0.004M 磷酸二氫鉀(pH=4.5)=40/60;
檢測波長: 268 nm
2、直接法
方法原理:牛乳中的鉀在β-內(nèi)酰胺酶的作用下,主要生成青霉噻唑酸鉀,并伴隨生成少量的、青霉醛等物質(zhì)。經(jīng)去脂肪、蛋白等前處理后,可以將青霉噻唑酸鉀提取出來,經(jīng)有效液相色譜儀檢測確認(rèn)其是否存在,從而判定該牛乳是否為人造“無抗奶"。
實驗步驟:稱取20 g試樣,在4 ℃、16000 rpm條件下離心10 min。取下層清液10 g于50 mL塑料離心管,加入無水乙醇15 mL,振蕩提取30 min后離心,取清液經(jīng)0.45 μm的濾膜過濾,用有效液相色譜儀檢測。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:稱取0.01 g(**至0.001 g)鉀于100 ml容量瓶中,加入1ml市售抗生素分解劑,室溫放置2h使鉀酶解后用去離子水定容,擁有青霉噻唑酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液,濃度100 μg/mL。根據(jù)實際情況稀釋后使用。
色譜條件:
LC-3000有效液相色譜儀配3000型紫外檢測器;
lanbo色譜柱 :C18(4.6mm×150mm×5μm);
流動相: 甲醇/0.004 M磷酸二氫鉀(pH=4.5)=40/60;
檢測波長: 230 nm
LC-3000液相色譜儀系統(tǒng):
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整套系統(tǒng)由P3000高壓泵、UV3000檢測器、進樣閥、溶劑托盤、色譜柱、工作軟件等組成;安裝、調(diào)試及使用都非常簡單。
P3000高壓是以CPLD技術(shù)為核心,由單片機控制的高精密系統(tǒng)。全數(shù)字頻率發(fā)生系統(tǒng),*的馬達驅(qū)動系統(tǒng)友好的人機顯示界面使操作很方便,*的泵頭及單項閥設(shè)計思路,融匯了當(dāng)今世界上***的經(jīng)驗,使該系統(tǒng)在各種條件下都能保證輸液的精度及重復(fù)性。
UV3000是一種分光檢測器,可以匹配任何,適用于化學(xué)分析、農(nóng)藥、制藥、化工等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。采用了全數(shù)字、高集成化設(shè)計理念,大大降低儀器的噪聲;基于數(shù)字信號傳輸和處理,該檢測器的信號可直接輸入到計算機的串行口進行采集,甩掉了傳統(tǒng)儀器**使用的數(shù)據(jù)采集卡!
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