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廣州健侖生物科技有限公司


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黃熱病毒ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地廣州市

聯(lián)系方式:全國(guó)東查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2016-08-04 15:36:33瀏覽次數(shù):355次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:1563條

所在地區(qū):廣東廣州市

聯(lián)系人:全國(guó)東 (市場(chǎng)總監(jiān))

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

*,黃熱病毒診斷試劑盒

詳細(xì)介紹

 黃熱病毒酶聯(lián)免試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑僅供研究使用      目的:本試劑盒用于檢測(cè)人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中黃熱病毒抗原(YFV-Ag)水平。

實(shí)驗(yàn)原理:

 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中人黃熱病毒抗原(YFV-Ag)。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中黃熱病毒抗原(YFV-Ag)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人黃熱病毒抗原(YFV-Ag)的存在與否。

試劑盒組成:

試劑盒組成

96孔配置

保存

說(shuō)明書(shū)

1

 

封板膜

2片(96

 

密封袋

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×96

2-8℃保存

陰性對(duì)照

0.5ml×1

2-8℃保存

陽(yáng)性對(duì)照

0.5ml×1

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟:

1.         編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.         加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4.         配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用

5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.         溫育:操作同3。

8.         洗滌:操作同5

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘

10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.     測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

結(jié)果判定:

  試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10

 臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

 陰性判定:樣品OD臨界值(CUT OFF)者為人黃熱病毒抗原(YFV-Ag)陰性

 陽(yáng)性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為人黃熱病毒抗原(YFV-Ag)陽(yáng)性

注意事項(xiàng)

1.操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請(qǐng)避光保存。

6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

 http://www.lsbuy.com/html/31896556.html

【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】   
【】
【電子郵件】 
Service@jianlun.com、
【騰訊 】 712628581
【公司】 www.jianlun.com 
【營(yíng)銷中心】 廣州市中山大道中358號(hào)東溪大廈B座511室
【公司地址】 廣州市天河區(qū)車(chē)陂第十五工業(yè)園一幢4067室

關(guān)鍵詞:酶標(biāo)儀

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